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lyf2003新蟲 (初入文壇)
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[求助]
帶氨基的磁納米粒子表面用戊二醛改性后，如何表征醛基的含量？ 已有2人參與
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本人將改性后的氨基磁珠與戊二醛反應(yīng)，使磁珠表面帶有醛基，從而可與蛋白質(zhì)鍵合，但是在優(yōu)化戊二醛用量及反應(yīng)pH值時，表征出現(xiàn)困難，想給位大俠求助 實驗步驟： 1）磁珠上的氨基與戊二醛的醛基反應(yīng)時，在吡啶的水溶液（10mM, pH6.0鹽酸調(diào)節(jié)pH值）中反應(yīng)，戊二醛濃度5%，室溫攪拌反應(yīng)3h 2）反應(yīng)完畢后，用水清洗5次，使未反應(yīng)戊二醛基本清洗干凈 3）將鹽酸羥胺溶液（pH=5.0,NaOH調(diào)節(jié)以除去鹽酸羥胺中游離的HCL）（其用量相對于磁珠的醛基是過量的）50ml與清洗后的醛基磁珠在40度下攪拌反應(yīng)4h 4）用pH計測量反應(yīng)后的pH值，理論上，由于醛基與鹽酸羥胺反應(yīng)，生成肟，并釋放出與醛基等量的HCL，用NaOH滴定至pH=5.0時，根據(jù)消耗NaOH的體積計算醛基的摩爾數(shù) 問題： 1）整個實驗反應(yīng)完后，pH值基本無變化 自己分析原因：a.可能鹽酸羥胺來表征醛基含量不合適，正準(zhǔn)備直接用適量的戊二醛與鹽酸羥胺溶液反應(yīng)，觀察反應(yīng)后pH值的變化，并用氫氧化鈉滴定，計算出醛基含量與配制的醛基含量作對比，看誤差有多大；b. 與氨基通過希夫堿形式連接的戊二醛由于碳氮雙鍵不穩(wěn)定，在水清洗過程中或在與鹽酸羥胺溶液（pH=5.0）反應(yīng)時 ，水解掉了，本人對有機(jī)合成只知甚少，不知道脂肪醛的希夫堿是不是在水清洗時就能洗掉呢？文獻(xiàn)中將到希夫堿容易在酸性條件下水解，是不是在鹽酸羥胺溶液（pH=5.0）中水解了呢？可是就算水解了，生成的戊二醛也應(yīng)該能與鹽酸羥胺反應(yīng)啊，反應(yīng)后的pH值怎么會不變呢？ 2）接著將反應(yīng)溶液放置過夜，第二天來測pH值，pH值從5.0下降至4.7左右，必思不得其解，這是什么原因呢？ 3）此試驗重復(fù)了2遍，每次2個樣品同時反應(yīng)，均出現(xiàn)此情況，是不是因為材料中含有希夫堿結(jié)構(gòu)（不穩(wěn)定）使得采用羥胺法進(jìn)行醛基的含量測定變得不可行呢？ 求有經(jīng)驗的大俠指點，不勝感激，拜謝！ |
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lyf2003
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