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后悔無期金蟲 (小有名氣)
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[求助]
RACE 技術(shù)
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1、模板確定5`和3`后，5RACE的引物設(shè)計(jì)是與模板序列反向互補(bǔ)， 3RACE與模板序列相同? 2、TA克隆，平板或者菌液PCR的假陽(yáng)性很高，可能存在啥原因呢？ |
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后悔無期
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送紅花一朵 3樓2013-07-02 08:06:58
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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amisking: 金幣+5, MolEPI+1, 很到位的講解啊 2013-07-01 18:48:57
后悔無期: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-07-02 08:07:33
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后悔無期: 金幣+10, ★★★很有幫助 2013-07-02 08:07:33
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第一個(gè)問題 3‘RACE是為了得到未知cDNA的下游部分，所以3‘RACE引物是“已知序列的一部分”，目的是于互補(bǔ)序列結(jié)合，在已知序列上尋找合適的片段就可以了。 而5’RACE引物雖然也是“已知序列的一部分”，但是由于延伸方向必須是5“－－3”，所以其延伸方向和已知序列相反，目的是于自身已知序列結(jié)合，也就是說，可以在已知序列上尋找合適的片段做引物，但是寫出來的是其“反向互補(bǔ)的序列”。 附件是我以前搜集的資料，講得比較詳細(xì)，你可以下下來看看 |
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2013-07-01 17:22:22, 25 K
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
2樓2013-07-01 17:22:38
后悔無期
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4樓2013-07-02 08:12:12
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5樓2013-07-02 08:16:15
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