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拉風(fēng)蝸牛王金蟲 (正式寫手)
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[求助]
測某種化合物對特定酶的抑制作用
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最近在做酶活抑制實(shí)驗(yàn)，在160uM抑制劑濃度下反應(yīng)10分鐘后測吸光值，計(jì)算得抑制率為42%，2分鐘后我又測了一次吸光值，計(jì)算得抑制率變?yōu)?1%,再2分鐘后我又測了一次吸光值，抑制率變?yōu)?0%，之后每隔2分鐘測一次，得到的抑制率依次為：39%，35%，34%。在其他抑制劑濃度下也有同樣的趨勢出現(xiàn)。我的吸光值都是在2-3.5之間的。 請教各位高手，出現(xiàn)這種情況是什么原因，做酶活抑制試驗(yàn)需要滿足什么條件才行。 謝謝謝謝謝謝�。。。。�！ 如果不方便回答的話，求大師給個(gè)鏈接，我自己看也行，或者給篇文獻(xiàn)的標(biāo)題，我自己找來看看也行！！ 謝謝謝謝謝謝�。。。。�！ |
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拉風(fēng)蝸牛王: 金幣+6, ★★★很有幫助 2013-07-05 13:54:37
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首先 吸光值在0.1-0.9之間才可靠 儀器讀數(shù)是有一個(gè)可信范圍的 超過這個(gè)范圍的讀數(shù)無意義 請稀釋酶濃度 再者 延長時(shí)間 吸光值會下降 說明這個(gè)時(shí)候反應(yīng)沒到平衡 建議延長反應(yīng)時(shí)間 或者所有的樣品都在統(tǒng)一的時(shí)間點(diǎn)測定 |
2樓2013-07-05 00:19:43
MaoNaiJi
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6樓2013-07-07 18:32:48
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8樓2013-07-08 20:06:29
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9樓2013-07-10 21:45:54
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10樓2013-07-10 22:27:25
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