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拉風(fēng)蝸牛王金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
測(cè)某種化合物對(duì)特定酶的抑制作用
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最近在做酶活抑制實(shí)驗(yàn),在160uM抑制劑濃度下反應(yīng)10分鐘后測(cè)吸光值,計(jì)算得抑制率為42%,2分鐘后我又測(cè)了一次吸光值,計(jì)算得抑制率變?yōu)?1%,再2分鐘后我又測(cè)了一次吸光值,抑制率變?yōu)?0%,之后每隔2分鐘測(cè)一次,得到的抑制率依次為:39%,35%,34%。在其他抑制劑濃度下也有同樣的趨勢(shì)出現(xiàn)。我的吸光值都是在2-3.5之間的。 請(qǐng)教各位高手,出現(xiàn)這種情況是什么原因,做酶活抑制試驗(yàn)需要滿(mǎn)足什么條件才行。 謝謝謝謝謝謝。。。。! 如果不方便回答的話,求大師給個(gè)鏈接,我自己看也行,或者給篇文獻(xiàn)的標(biāo)題,我自己找來(lái)看看也行! 謝謝謝謝謝謝。。。。! |
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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首先 吸光值在0.1-0.9之間才可靠 儀器讀數(shù)是有一個(gè)可信范圍的 超過(guò)這個(gè)范圍的讀數(shù)無(wú)意義 請(qǐng)稀釋酶濃度 再者 延長(zhǎng)時(shí)間 吸光值會(huì)下降 說(shuō)明這個(gè)時(shí)候反應(yīng)沒(méi)到平衡 建議延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間 或者所有的樣品都在統(tǒng)一的時(shí)間點(diǎn)測(cè)定 |
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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