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小鳥不億人新蟲 (初入文壇)
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[求助]
電泳新手上路請(qǐng)求幫助><
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老師突然要我跑電泳，想借助電泳直觀觀察發(fā)酵過程中大豆蛋白的降解情況。算是一個(gè)輔助或者佐證，要求不是很高。 濃縮膠5%；分離膠12%；電壓75V-100V，總時(shí)間大概100min 字有點(diǎn)多麻煩大家了 1.我現(xiàn)在還不太會(huì)分析電泳圖，我這塊膠是跑過頭了嗎？這樣算是拖尾嗎？我的蛋白濃度合適嗎？是否需要提高濃度？ 2.除去marker外，從左數(shù)第一到第七是同個(gè)樣品相同條件下隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)蛋白的變化情況，第一到第四很清楚我能看出來，5、6、7同樣的處理方法為什么和前四個(gè)條帶不一樣呢？ 3.很多人說加入上樣緩沖液煮沸后要離心，然后用槍頭打散再上樣。我想問離心的作用是什么？上樣之前還要打散那不是把雜質(zhì)都攪上來了嗎？我測(cè)這種屬于食品類的東西，雖然是發(fā)酵食品的但是細(xì)胞碎片不會(huì)很多吧，也需要離心嗎？ 4.加樣的時(shí)候發(fā)現(xiàn)飄的有些厲害，我可以把2×上樣緩沖液換成5×嗎（樣品液體積不變）？ 5.我把樣品凍干之后加水溶解，離心取上清，然后直接加loading buffer煮沸上樣，從圖上看需要去除雜質(zhì)嗎？ 還有哪些問題請(qǐng)大神幫我指出來吧，跪謝了。。。。。。。。。。。。。 IMG_2852.JPG |
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2樓2013-07-11 13:05:22
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