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小核桃小銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于免疫共沉淀 已有2人參與
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我最近在做免疫共沉淀，文獻上面看到做出來的圖片各異。我的目的是做兩個蛋白之間有無相互作用，估且稱A和B蛋白吧，我自認為出的圖應(yīng)該是四個條帶，如圖（CO-IP后的WB圖片，input跑兩個泳道是為了證明總蛋白里面既有A，又有B蛋白）。假設(shè)我用A作為一抗，如果A和B之間有相互作用，那么后面WB分析，在INPUT里面和CO-IP里B處均出現(xiàn)條帶，而conrto IgG陰性條帶。不知道我理解的對不對，圖片應(yīng)不應(yīng)該是這個樣子，我畫了一個模擬圖，請大家?guī)兔Ψ治鲆幌隆?br />
IMG_1224.JPG |
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小核桃小
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10樓2013-07-09 21:58:25
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
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137167741: 金幣+2, 小木蟲交流，共同進步~~ 2013-07-08 16:28:55
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137167741: 金幣+2, 小木蟲交流，共同進步~~ 2013-07-08 16:28:55
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理論圖不靠譜的， 實際上還要根據(jù)你的目的蛋白C和與目的蛋白作用的蛋白D的特點來看。理論上應(yīng)只有CD出現(xiàn)，但實際上很少能做到，可能C和很多別的蛋白都出現(xiàn)了，卻沒找到D。C若是個蛋白家族成員，成員間都很相似，那么麻煩就一打一打兒的多啦，可能沉淀出來一堆C1C2C...和D1D2D... 所以想去的理想效果，保證C的專一性，另外根據(jù)IP的特點考慮實驗可能結(jié)果。 |
4樓2013-07-08 12:49:34
bullfrog325
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12樓2013-08-29 10:26:08
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2樓2013-07-07 21:30:19
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3樓2013-07-08 10:55:04
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什么上清里的圖？ 5樓2013-07-08 22:59:54
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6樓2013-07-08 23:00:29
9樓2013-07-09 15:31:11
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