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[交流] 標(biāo)準(zhǔn)曲線配制

請(qǐng)教大神，做標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以把2倍的母液，用移液槍依次稀釋嗎？如果不能，究竟為什么?我最近做了4條標(biāo)曲，都是r=1.0000,被老板罵說作假。個(gè)人認(rèn)為，移液槍等倍稀釋，誤差小得多，為什么不行呢？難道四條標(biāo)曲都是1.0000，只是偶然嗎？

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1樓 2013-07-08 17:57:26

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醉落塵凡

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huaruishi(金幣+1): 謝謝參與
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huaruishi: 金幣+2 2013-07-09 20:30:21

做標(biāo)準(zhǔn)曲線還真沒碰到過依次等倍稀釋的。一般都是以母液分別吸取一定體積，配制成系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。實(shí)際上，樓主四條標(biāo)準(zhǔn)曲線R=1.0000還真不怪老板說作假。等倍稀釋操作本身就會(huì)導(dǎo)致R=1.0000。

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2樓2013-07-08 18:09:57

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那么那個(gè)r=1.0000是不是因?yàn)樽畲笙薅缺苊饬苏`差才出現(xiàn)的呢？吸母液時(shí)用移液管和容量瓶會(huì)不會(huì)帶來較大的誤差？

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3樓2013-07-08 18:24:35

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huaruishi: 金幣+2 2013-07-09 20:31:40

并不是因?yàn)楸苊饬苏`差哦。而是等倍稀釋會(huì)導(dǎo)致r=1.0000的出現(xiàn)。實(shí)際上移液誤差可能比移液管的大，尤其是移液槍沒校準(zhǔn)的時(shí)候。

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4樓2013-07-09 00:55:25

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release53

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huaruishi: 金幣+1 2013-07-09 20:31:57

制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)溶液配制不是都要吧母液移取固定體積，然后配制成一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)液么？還可以用移液槍依次稀釋的？

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5樓2013-07-09 11:16:57

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07sakura

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huaruishi(金幣+1): 謝謝參與

個(gè)人覺得問題在于你只吸取了一次，然后你的其他線性點(diǎn)都是依次在母液上面稀釋出來的，那么你線性實(shí)際只是由一個(gè)點(diǎn)做出的理論延長(zhǎng)，當(dāng)你這個(gè)點(diǎn)發(fā)生偏差的時(shí)候，線性的R值實(shí)際上沒有反應(yīng)出來。
個(gè)人愚見，沒學(xué)過統(tǒng)計(jì)學(xué)。。。

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6樓2013-07-09 14:41:12

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引用回帖:

2樓: Originally posted by 醉落塵凡 at 2013-07-08 18:09:57
做標(biāo)準(zhǔn)曲線還真沒碰到過依次等倍稀釋的。一般都是以母液分別吸取一定體積，配制成系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。實(shí)際上，樓主四條標(biāo)準(zhǔn)曲線R=1.0000還真不怪老板說作假。等倍稀釋操作本身就會(huì)導(dǎo)致R=1.0000。

謝謝指點(diǎn)！

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7樓2013-07-09 20:31:07

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送紅花一朵

引用回帖:

6樓: Originally posted by 07sakura at 2013-07-09 14:41:12
個(gè)人覺得問題在于你只吸取了一次，然后你的其他線性點(diǎn)都是依次在母液上面稀釋出來的，那么你線性實(shí)際只是由一個(gè)點(diǎn)做出的理論延長(zhǎng)，當(dāng)你這個(gè)點(diǎn)發(fā)生偏差的時(shí)候，線性的R值實(shí)際上沒有反應(yīng)出來。
個(gè)人愚見，沒學(xué)過統(tǒng)計(jì) ...

大神高見！可惜沒錢了。抱歉啊！

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8樓2013-07-09 20:33:14

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406119994

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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

引用回帖:

是真的嗎？我從學(xué)習(xí)配制標(biāo)準(zhǔn)溶液開始（跟一個(gè)博士師兄學(xué)的），就一直是等倍逐級(jí)稀釋呢。這樣做有什么不好嗎？

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9樓2020-06-17 14:35:00

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jiazi45

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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

其實(shí)這個(gè)問題還涉及到一個(gè) 有效數(shù)字的數(shù)學(xué)問題，以及實(shí)際操作的重現(xiàn)問題。

同樣對(duì)于母液1.00 mg/mL來講，按移液槍逐級(jí)等倍稀釋得到的濃度點(diǎn)依次是0.500、0.250、0.125、0.0625、0.0312...（mg/mL），按移液管習(xí)慣操作得到的濃度點(diǎn)依次可能是0.500、0.200、0.100、0.0500、0.0200...（mg/mL）；如果你的母液濃度是1.07 mg/mL之類的數(shù)據(jù)，會(huì)發(fā)現(xiàn)前者稀釋得到的濃度值處理會(huì)變成相當(dāng)困難，而且對(duì)于一部分沒有移液槍設(shè)備或使用習(xí)慣的同行來講，不亞于一場(chǎng)災(zāi)難。

如果還要照顧到方法的定量限，你會(huì)發(fā)現(xiàn)母液配制都會(huì)變成一個(gè)難題，所以要養(yǎng)成自己的標(biāo)液配制習(xí)慣，來匹配自己的檢測(cè)方法、數(shù)據(jù)處理等方方面面。

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10樓2020-06-18 17:33:17

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