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后悔無期金蟲 (小有名氣)
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[求助]
測(cè)序
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| 為什么測(cè)序出來的結(jié)果會(huì)含有大量重復(fù)序列，并且都是載體的序列？ |
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myprayer: 金幣+1, Gifts of roses, there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-07-11 18:11:11
后悔無期: 金幣+5 2013-07-12 06:53:48
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后悔無期: 金幣+5 2013-07-12 06:53:48
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測(cè)的是質(zhì)粒？ 根據(jù)你用的是什么測(cè)序引物，從載體上可以看到是從哪個(gè)位置開始測(cè)出。 你也可以用比較靠近插入片段的測(cè)序引物，這樣測(cè)出來的載體上的序列就少一些。sanger測(cè)序一般測(cè)600bp可信。 |
2樓2013-07-11 08:40:01
后悔無期
金蟲 (小有名氣)
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3樓2013-07-11 15:53:06
nxguojunxian
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【答案】應(yīng)助回帖
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如果都是載體序列只能說明一個(gè)問題，就是這個(gè)克隆是空載，建議不要在這個(gè)克隆上浪費(fèi)太多時(shí)間，建議： 1 是不是用的藍(lán)白斑篩選，如果藍(lán)白斑不明顯，重新挑取多個(gè)克隆，做完菌落PCR后再測(cè)序。 2 送樣之前做一下酶切鑒定，切出目的條帶的再拿去測(cè)序。以免耽誤時(shí)間。 |
4樓2013-07-11 21:58:26
5樓2013-07-12 08:30:53
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