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后悔無(wú)期金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
測(cè)序
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| 為什么測(cè)序出來(lái)的結(jié)果會(huì)含有大量重復(fù)序列,并且都是載體的序列? |


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測(cè)的是質(zhì)粒? 根據(jù)你用的是什么測(cè)序引物,從載體上可以看到是從哪個(gè)位置開(kāi)始測(cè)出。 你也可以用比較靠近插入片段的測(cè)序引物,這樣測(cè)出來(lái)的載體上的序列就少一些。sanger測(cè)序一般測(cè)600bp可信。 |

金蟲(chóng) (小有名氣)

新蟲(chóng) (初入文壇)
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如果都是載體序列只能說(shuō)明一個(gè)問(wèn)題,就是這個(gè)克隆是空載,建議不要在這個(gè)克隆上浪費(fèi)太多時(shí)間,建議: 1 是不是用的藍(lán)白斑篩選,如果藍(lán)白斑不明顯,重新挑取多個(gè)克隆,做完菌落PCR后再測(cè)序。 2 送樣之前做一下酶切鑒定,切出目的條帶的再拿去測(cè)序。以免耽誤時(shí)間。 |
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