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本人在做液相的時候遇到了一個很奇怪的現(xiàn)象，現(xiàn)描述如下： 1，第一次做的時候，標準品在在線實時界面明明顯示的是一個峰，在離線數(shù)據(jù)里查看的時候居然出現(xiàn)了兩個連著的峰，不過前面那峰很小，分離度也還行，算是完全分開了，別人的解釋是標準品不穩(wěn)定很容易分解，但我在實時分析里面明明看到的是一個峰啊~~~~~~ 2，第二次做同一個樣品，用標準品做線性的時候，進樣量大于10 ul 標準品峰就分裂成兩個，但是是雙峰駱駝的肩峰，沒有分離度可言，兩個峰面積的和也正好成比例；而樣品里該物質(zhì)的濃度是標準品的3倍左右，進樣量同是10 ul （相當(dāng)于標準品進樣量30 ul），圖譜顯示一個峰，并沒有分裂成兩個峰。 3，標準品是咖啡酸，藥典的方法，覺得方法應(yīng)該是沒有問題的，想問一下如果是柱子的問題會不會出現(xiàn)這種情況。 盼大家積極回復(fù)，小女子有禮啦~~~~~~ |
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3樓2013-07-14 13:55:14
13樓2013-07-15 08:28:15
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14樓2013-07-15 15:34:32
15樓2013-07-15 20:47:39
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=2972445 建議樓主看看本版的HPLC相關(guān)帖子匯總，里面有很多情況都是新手常見的問題哦。 |
16樓2013-07-16 23:53:43
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
何超: 金幣+5, 非常有用 2013-07-17 20:35:40
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
何超: 金幣+5, 非常有用 2013-07-17 20:35:40
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第一個問題：可以看一下設(shè)置里面有沒有信號放大之類的，普通紫外檢測不會出現(xiàn)在線波長和離線波長不一致的情況，沒碰到過在線和離線不一致的問題。至于主峰前面有一個小峰，其實這種情況挺常見的，可能是柱子臟，可能樣品不純；走空白看一下，不影響檢測就行 第二個問題：用同一根柱子進了樣品的，根據(jù)峰面積顯示濃度是標準品的3倍，進樣量也是10 ul ，樣品顯示也是一個峰，我直接用標準品進30 ul 還是雙駝肩峰。 做線性沒有明確規(guī)定只能用不同濃度，不能用不同體積的方法（我沒查到），改進樣量做線性是可行的，但是有一定缺陷，進樣量越大，峰越寬，峰高越低，柱效低，一般還是一個峰（雙頭峰可能還是和柱子流動相有關(guān)），但是峰面積應(yīng)該還是一樣的。這也是做線性大都采用不同濃度，而不用不同體積的原因，雖然稀釋不同濃度可能增加誤差。含量線性要求80%-120%，進12ul應(yīng)該沒問題，30 ul就不好說了。這也是為什么藥典要規(guī)定進樣量，如果改變進樣量應(yīng)該重新驗證 |
17樓2013-07-17 11:20:21
18樓2013-07-17 20:37:36
19樓2013-07-20 00:13:45
簡單回復(fù)
ppandonghui11樓
2013-07-14 22:25
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