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菌液PCR
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| 大家好！最近做菌液PCR的時(shí)候，P出來(lái)結(jié)果是ddH2O里面都能P出引物二聚體，沒有目的條帶，引物是之前設(shè)計(jì)好的，沒有問(wèn)題，反應(yīng)體系和條件也是按照之前師姐的方法不變，之前都能P出條帶來(lái)，但之前沒有做過(guò)菌液PCR,請(qǐng)問(wèn)各位大蝦有木有懂的，教教我是哪里出了問(wèn)題啊？、 |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-16 17:32:52
libra小朵: 金幣+5 2013-07-18 18:33:44
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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libra小朵: 金幣+5 2013-07-18 18:33:44
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希望對(duì)你有幫助： 你為什么還要用菌液做PCR？你還不如搖菌后提取質(zhì)粒然后用質(zhì)粒PCR。 我覺得菌落PCR效果很好，雖然有假陽(yáng)性的可能，但是只要是做出來(lái)，有目的條帶一般是對(duì)的。 關(guān)于沒有目的條帶，我覺得很有可能是你的質(zhì)粒被稀釋了，因?yàn)樵诰渲械臐舛缺容^大；另外也有可能是你根本就沒有挑到正確的菌落來(lái)?yè)u菌，所以就沒有產(chǎn)物。 再就是的能確定是引物的二聚體么？你是否是從單一的聚落挑出來(lái)的？ |
2樓2013-07-16 16:43:53
3樓2013-07-16 17:28:11
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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- 蟲號(hào): 1614001
- 注冊(cè): 2012-02-13
- 專業(yè): 生物化學(xué)
4樓2013-07-17 04:12:59
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
5樓2013-07-17 08:51:07
6樓2013-07-18 18:37:07
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