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[求助]
菌液PCR
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| 大家好！最近做菌液PCR的時候，P出來結(jié)果是ddH2O里面都能P出引物二聚體，沒有目的條帶，引物是之前設(shè)計好的，沒有問題，反應(yīng)體系和條件也是按照之前師姐的方法不變，之前都能P出條帶來，但之前沒有做過菌液PCR,請問各位大蝦有木有懂的，教教我是哪里出了問題�。�、 |
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5樓2013-07-17 08:51:07
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
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myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-16 17:32:52
libra小朵: 金幣+5 2013-07-18 18:33:44
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libra小朵: 金幣+5 2013-07-18 18:33:44
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希望對你有幫助： 你為什么還要用菌液做PCR？你還不如搖菌后提取質(zhì)粒然后用質(zhì)粒PCR。 我覺得菌落PCR效果很好，雖然有假陽性的可能，但是只要是做出來，有目的條帶一般是對的。 關(guān)于沒有目的條帶，我覺得很有可能是你的質(zhì)粒被稀釋了，因?yàn)樵诰渲械臐舛缺容^大；另外也有可能是你根本就沒有挑到正確的菌落來搖菌，所以就沒有產(chǎn)物。 再就是的能確定是引物的二聚體么？你是否是從單一的聚落挑出來的？ |
2樓2013-07-16 16:43:53
3樓2013-07-16 17:28:11
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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4樓2013-07-17 04:12:59
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