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yangjingjing木蟲 (正式寫手)
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[求助]
qPCR的怪異結(jié)果
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| 各位大神好啊，我昨天做了qpcr，圖呢意外沒有保存下來~~~那我簡要描述下我的結(jié)果吧，一共六個樣，GAPDH~擴增的Rn-循環(huán)數(shù)圖：前面有一小點可忽略的波折，后面很長的直線，然后一致的對數(shù)上升，平臺有一點差異，Ct值五個在14.7，一個在15.1；溶解曲線：先是超級高的峰，其下有幾個小峰，然后直線，在80的位置有個50以下的峰，其下也有兩個小峰。拿這個結(jié)果跑瓊脂糖膠，單一條帶~~~~~~測下cDNA濃度都在120以上，qpcr模板都是兩微升，幫忙分析下原因吧，謝謝哈 |
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yb19841014
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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gyesang: 金幣+1, 鼓勵回帖應(yīng)助！ 2013-07-21 23:10:47
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| 肯定是有非特異的擴增，只不過跑電泳看不到而已 |
yangjingjing3樓2013-07-21 21:03:54
【答案】應(yīng)助回帖
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myprayer: 金幣+1, 對頭，引物不能反復(fù)凍融 2013-07-19 12:04:20
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myprayer: 金幣+1, 對頭，引物不能反復(fù)凍融 2013-07-19 12:04:20
| 引物反復(fù)凍融多次，已經(jīng)變質(zhì)了，你80的峰是引物二聚體 |
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2樓2013-07-19 09:00:59
yangjingjing
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4樓2013-07-23 00:07:48
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5樓2013-07-23 00:11:06
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