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yangjingjing木蟲(chóng) (正式寫手)
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[求助]
qPCR的怪異結(jié)果
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| 各位大神好啊，我昨天做了qpcr，圖呢意外沒(méi)有保存下來(lái)~~~那我簡(jiǎn)要描述下我的結(jié)果吧，一共六個(gè)樣，GAPDH~擴(kuò)增的Rn-循環(huán)數(shù)圖：前面有一小點(diǎn)可忽略的波折，后面很長(zhǎng)的直線，然后一致的對(duì)數(shù)上升，平臺(tái)有一點(diǎn)差異，Ct值五個(gè)在14.7，一個(gè)在15.1；溶解曲線：先是超級(jí)高的峰，其下有幾個(gè)小峰，然后直線，在80的位置有個(gè)50以下的峰，其下也有兩個(gè)小峰。拿這個(gè)結(jié)果跑瓊脂糖膠，單一條帶~~~~~~測(cè)下cDNA濃度都在120以上，qpcr模板都是兩微升，幫忙分析下原因吧，謝謝哈 |
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yangjingjing
木蟲(chóng) (正式寫手)
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5樓2013-07-23 00:11:06
【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 對(duì)頭，引物不能反復(fù)凍融 2013-07-19 12:04:20
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 對(duì)頭，引物不能反復(fù)凍融 2013-07-19 12:04:20
| 引物反復(fù)凍融多次，已經(jīng)變質(zhì)了，你80的峰是引物二聚體 |
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2樓2013-07-19 09:00:59
yb19841014
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-07-21 23:10:47
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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| 肯定是有非特異的擴(kuò)增，只不過(guò)跑電泳看不到而已 |
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3樓2013-07-21 21:03:54
yangjingjing
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4樓2013-07-23 00:07:48
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