 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3757 | 回復(fù): 3 | ||
阿老鐵蟲 (初入文壇)
|
[求助]
異硫氰酸胍水浴加熱后溶解，常溫下馬上析出，這是怎么回事？
|
|
最近在做精子DNA提取實驗，采用參考文獻“Methods of sperm DNA extraction for genetic and epigenetic studies”的方法，需配制含 高濃度（5M）異硫氰酸胍的裂解液，發(fā)現(xiàn)將異硫氰酸胍水浴加熱溶解后，拿出水浴鍋，溫度一冷卻下來立馬析出，這是怎么回事？ 裂解液的成分： 5M 異硫氰酸胍 100mM NaCl； 1% SDS； 2% β-巰基乙醇 200ul/ml 蛋白酶K 具體配制過程如下： 由于異硫氰酸胍需水浴加熱，我先配制了含100mM NaCl，1% SDS，2% β-巰基乙醇三種成分的溶液，取2ml配制后的溶液加入1.18g異硫氰酸胍，于65℃水浴中溶解，配制后存在以下兩個問題： 1）如果我不馬上加入蛋白酶K進行消化裂解，而是想將裂解液在常溫下保存，從水浴鍋拿出來后，溶液一回到常溫硫氰酸胍立馬會析出。 2）如果我加入蛋白酶K和精子樣品，56℃下消化2h后，將樣品取出做進一步抽提時，還是會析出沉淀，這是什么回事？消化之后我加入0.6倍體積異丙醇之后并沒有見到絮狀DNA。 所以我的疑問是： 異硫氰酸胍在溶解配制裂解液（常用于提取RNA）時有什么要求嗎？PH，溶劑類型？ 如果異硫氰酸胍析出是正�，F(xiàn)象，那近一步實驗應(yīng)該怎么改進，有沒有什么好的建議？ 另：異硫氰酸胍為前2天剛從solarbio（索來寶）公司買的，質(zhì)量上應(yīng)該沒有問題。 附近為參考文獻 |
回復(fù)此樓» 本帖附件資源列表
-
歡迎監(jiān)督和反饋：小木蟲僅提供交流平臺，不對該內(nèi)容負(fù)責(zé)。
本內(nèi)容由用戶自主發(fā)布，如果其內(nèi)容涉及到知識產(chǎn)權(quán)問題，其責(zé)任在于用戶本人，如對版權(quán)有異議，請聯(lián)系郵箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 222442x9Q.pdf
2013-07-24 22:24:25, 184.86 K
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有295人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有3人回復(fù)
2樓2013-07-25 11:11:06
3樓2013-07-25 11:20:34
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
4樓2020-10-14 16:47:12
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 阿老 的主題更新
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿食品科學(xué)與工程083200求調(diào)劑 +4 | XQTJZ 2026-03-30 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +5 | AZMK 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +6 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | @MZB382400 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +7 | DLkz1314. 2026-03-30 | 7/350 |
|
|
[考研] 化學(xué)308分調(diào)劑 +7 | 你好明天你好 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085404求調(diào)劑，總分309，本科經(jīng)歷較為豐富 +6 | 來財aa 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +5 | BrightLL 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070305高分子化學(xué)與物理 304分求調(diào)劑 +12 | c297914 2026-03-28 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 311（085601）求調(diào)劑 +4 | liziyeyeye 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +12 | PolarBear11 2026-03-26 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 085602 307分 求調(diào)劑 +7 | 不知道叫什么！ 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085405 考的11408求各位老師帶走 +3 | Qiu學(xué)ing 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑，各位老師看看我�。�！ +5 | 祁祺祺 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)求調(diào)劑 +4 | 起個名咋這么難 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 08開頭275求調(diào)劑 +4 | 拉誰不重要 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)一志愿南京師范大學(xué)303求調(diào)劑 +3 | zzffylgg 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +4 | lim0922 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 網(wǎng)絡(luò)空間安全0839招調(diào)劑 +4 | w320357296 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料專碩331求調(diào)劑 +4 | 鮮當(dāng)牛 2026-03-24 | 4/200 |
|