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果A果新蟲 (初入文壇)
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[求助]
植物葉片紅葉石楠石蠟切片，組織不完整，碎的，求解啊，急��！各位好心的大俠幫幫忙吧 已有1人參與
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| 植物葉片紅葉石楠石蠟切片，切片展開后在顯微鏡下觀察植物組織都完整，上下表皮都完整，柵欄組織也排列整齊，但55℃烘片4小時(shí)后，脫蠟（純二甲苯1h兩次，1/2二甲苯1/2酒精5min，酒精梯度100%，85%，70%，50%，30%，水各5min，）番紅染色過夜，脫色5s，固綠10s，脫色5s,封片后在顯微鏡下觀察組織全碎了，而且是一段有一段沒有的，番紅也染不上，觀察不到紅色，請問這是什么原因？求各位大俠幫助啊，急啊. |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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這個(gè)是我自己做石蠟切片的脫蠟程序：主要參考了科學(xué)出版社出版李和平主編《植物顯微技術(shù)（第二版）》部分內(nèi)容。一般的組織都可以切得出來。 •脫蠟： 1、 二甲苯Ⅰ，30min。 2、 二甲苯Ⅱ，3min。 3、 無水乙醇與二甲苯1：1溶液，3min。 •復(fù)水 1、 無水乙醇，3min。 2、 95%乙醇Ⅰ，3min。 3、 80%乙醇，3min。 4、 70%乙醇，3min。 5、 50%乙醇，3min。（50%乙醇=50mL95%乙醇+45mL蒸餾水） 6、 30%乙醇，3min。（30%乙醇=30mL95%乙醇+65mL蒸餾水） 7、 蒸餾水Ⅰ，3min。 •染色： 番紅水溶液（1%），2h。 番紅染色液的配制： 成分 用量 配制方法 番紅 1g 將番紅溶于蒸餾水中，使其完全溶解，過濾。 蒸餾水 100mL •脫水： 1、 蒸餾水Ⅱ，3min。 2、 蒸餾水Ⅰ，3min。 3、 30%乙醇，3min。 4、 50%乙醇，3min。 5、 70%乙醇，3min。 6、 80%乙醇，3min。 7、 95%乙醇，3min。 •染色： 固綠水溶液（95%），50s。 固綠染色液的配制： 成分 用量 配制方法 固綠 0.5g 將固綠溶于乙醇中，使其完全溶解，過濾。 95%乙醇 100mL •透明： 1、95%乙醇Ⅱ，3min。 2、無水乙醇，3min。 3、無水乙醇與二甲苯1：1溶液，3min。 4、 二甲苯Ⅰ，3min。 5、 二甲苯Ⅱ，3min。 封片 從上一步的二甲苯Ⅱ中撈出（戴手套），趁二甲苯?jīng)]干之前在載玻片正面用玻璃棒滴上2～3滴中性樹膠（中性樹膠與二甲苯3：1），然后用鑷子將蓋玻片蓋上，拿到溫箱40℃烘干兩天。 |
2樓2013-07-27 10:39:14
3樓2013-07-30 10:27:03
何超小
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4樓2017-05-14 22:18:19
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5樓2017-05-14 22:19:37
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6樓2017-05-15 08:40:50
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