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果A果新蟲 (初入文壇)
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[求助]
植物葉片紅葉石楠石蠟切片,組織不完整,碎的,求解啊,急!各位好心的大俠幫幫忙吧 已有1人參與
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| 植物葉片紅葉石楠石蠟切片,切片展開后在顯微鏡下觀察植物組織都完整,上下表皮都完整,柵欄組織也排列整齊,但55℃烘片4小時(shí)后,脫蠟(純二甲苯1h兩次,1/2二甲苯1/2酒精5min,酒精梯度100%,85%,70%,50%,30%,水各5min,)番紅染色過夜,脫色5s,固綠10s,脫色5s,封片后在顯微鏡下觀察組織全碎了,而且是一段有一段沒有的,番紅也染不上,觀察不到紅色,請(qǐng)問這是什么原因?求各位大俠幫助啊,急啊. |
金蟲 (小有名氣)
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這個(gè)是我自己做石蠟切片的脫蠟程序:主要參考了科學(xué)出版社出版李和平主編《植物顯微技術(shù)(第二版)》部分內(nèi)容。一般的組織都可以切得出來。 •脫蠟: 1、 二甲苯Ⅰ,30min。 2、 二甲苯Ⅱ,3min。 3、 無水乙醇與二甲苯1:1溶液,3min。 •復(fù)水 1、 無水乙醇,3min。 2、 95%乙醇Ⅰ,3min。 3、 80%乙醇,3min。 4、 70%乙醇,3min。 5、 50%乙醇,3min。(50%乙醇=50mL95%乙醇+45mL蒸餾水) 6、 30%乙醇,3min。(30%乙醇=30mL95%乙醇+65mL蒸餾水) 7、 蒸餾水Ⅰ,3min。 •染色: 番紅水溶液(1%),2h。 番紅染色液的配制: 成分 用量 配制方法 番紅 1g 將番紅溶于蒸餾水中,使其完全溶解,過濾。 蒸餾水 100mL •脫水: 1、 蒸餾水Ⅱ,3min。 2、 蒸餾水Ⅰ,3min。 3、 30%乙醇,3min。 4、 50%乙醇,3min。 5、 70%乙醇,3min。 6、 80%乙醇,3min。 7、 95%乙醇,3min。 •染色: 固綠水溶液(95%),50s。 固綠染色液的配制: 成分 用量 配制方法 固綠 0.5g 將固綠溶于乙醇中,使其完全溶解,過濾。 95%乙醇 100mL •透明: 1、95%乙醇Ⅱ,3min。 2、無水乙醇,3min。 3、無水乙醇與二甲苯1:1溶液,3min。 4、 二甲苯Ⅰ,3min。 5、 二甲苯Ⅱ,3min。 封片 從上一步的二甲苯Ⅱ中撈出(戴手套),趁二甲苯?jīng)]干之前在載玻片正面用玻璃棒滴上2~3滴中性樹膠(中性樹膠與二甲苯3:1),然后用鑷子將蓋玻片蓋上,拿到溫箱40℃烘干兩天。 |
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