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herjasmine新蟲 (初入文壇)
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分子量13KDa的蛋白的轉(zhuǎn)膜條件？ 已有2人參與
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| 最近在做一個(gè)分子量13KDa的小分子蛋白，每次都在轉(zhuǎn)膜的一步出問(wèn)題（膠是12%的、樣品做其他的蛋白也做出來(lái)了）。跑完膠后MARKER還完整漂亮的在膠上，轉(zhuǎn)膜完后就只能見到前面的大分子的MARKER了。小分子10KDa的MARKER就不見了，然后立春紅染色膜上15KDa以下的蛋白條帶都看不見�？既灸z上15KDa以下的蛋白條帶也看不見了。轉(zhuǎn)膜的條件試過(guò)如下幾種都失敗了：1、350mA 1h；2、200mA 1h；3、200mA 45min；4、75mA 70min;5、350mA 45min;以上的轉(zhuǎn)膜條件有參考其他老師做小分子條件的，有在此基礎(chǔ)上修改了一下的，也有參考文獻(xiàn)的，都失敗了。同樣都是10KDa marker轉(zhuǎn)不上，染色后蛋白也看不見。因?yàn)閾?dān)心立春紅敏感度不夠好，我也做到用ECL掃膜，但是最后也是沒有條帶的。請(qǐng)大家?guī)兔ο胂朕k法吧，謝謝了！ |
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