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hiyellow銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
puromycin篩選細(xì)胞的問題
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| 之前我往HeLa里轉(zhuǎn)染了一個(gè)帶puromycin抗性的質(zhì)粒,然后就用加了puromycin的培養(yǎng)基養(yǎng)著,開始幾天死了一些細(xì)胞,后來到現(xiàn)在都已經(jīng)過了一個(gè)半月了,怎么細(xì)胞都還是長得好好的呢?本來擔(dān)心是我的puromycin失效了,所以用這個(gè)培養(yǎng)基換液到的野生HeLa,差不多四天這些野生HeLa就都死了。那我之前轉(zhuǎn)染的細(xì)胞怎么會(huì)這樣呢?是轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒還沒降解嗎? |

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專家經(jīng)驗(yàn): +24 |
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轉(zhuǎn)染了一個(gè)帶puromycin抗性的質(zhì)粒,然后就用加了puromycin的培養(yǎng)基養(yǎng)著,開始幾天死了一些細(xì)胞,后來到現(xiàn)在都已經(jīng)過了一個(gè)半月了,細(xì)胞當(dāng)然還是長得好好的,因?yàn)槟戕D(zhuǎn)染了抗puromycin的質(zhì)粒啊,到現(xiàn)在一個(gè)半月了,細(xì)胞不死,說明你篩出了穩(wěn)定株,你的這個(gè)質(zhì)粒在puromycin持續(xù)篩選的壓力下整合到染色體上去了哈, 此外,不知道你實(shí)驗(yàn)的目的是什么,轉(zhuǎn)質(zhì)粒用puromycin篩選不就是要篩選出抗puromycin的細(xì)胞嗎? |

銀蟲 (初入文壇)

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