 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2129 | 回復(fù): 12 | ||||
12108080銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
量子點通過鏈霉親和素-生物素反應(yīng)連接抗體，怎么分離
|
|||
| 我的量子點上聯(lián)有鏈霉親和素，抗體上有生物素，現(xiàn)在想探索二者合適的比例使其充分連接，盡量減少浪費(fèi)。但是我不知道用什么手段檢測量子點是否結(jié)合上抗體，結(jié)合了多少。 所以請教大牛，通常用什么方法檢測？ 還有，有沒有什么方法，能把我需要的偶聯(lián)抗體的量子點分離出來呢？各位出來幫幫忙呀，剛開始做實驗一個月了還兩眼抓瞎呢 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 蛋白質(zhì)生物學(xué)實驗經(jīng)驗 | 精華帖收集 |
» 猜你喜歡
【2026考研調(diào)劑】制藥工程 284分 求相關(guān)專業(yè)調(diào)劑名額
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
334分 一志愿武理-080500 材料求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
0854電子信息求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
347求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
0854人工智能方向招收調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
求b區(qū)院校調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料與化工考研調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
總分293求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
284求調(diào)劑
已經(jīng)有15人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 急問:生物素(biotin)在60攝氏度下反應(yīng)1小時會被破壞嗎?還能與親和素結(jié)合嗎?
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 磁珠和抗體怎樣連接？怎樣證明連接成功？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】有關(guān)鏈霉親和素和生物素
已經(jīng)有18人回復(fù)
conanzzz
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 76 (初中生)
- 金幣: 4633.5
- 散金: 248
- 紅花: 5
- 帖子: 524
- 在線: 383小時
- 蟲號: 818114
- 注冊: 2009-07-29
- 專業(yè): 細(xì)胞生物學(xué)研究中的新方法
6樓2013-08-03 12:19:05
ty10086 
捐助貴賓 (小有名氣)
- BioEPI: 1
- 應(yīng)助: 15 (小學(xué)生)
- 金幣: 1309.7
- 散金: 114
- 紅花: 1
- 帖子: 228
- 在線: 277.2小時
- 蟲號: 463845
- 注冊: 2007-11-20
- 專業(yè): 抗體工程學(xué)
7樓2013-08-04 13:29:56
凌波麗
專家顧問 (知名作家)
-
專家經(jīng)驗: +218 - BioEPI: 11
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.044
- 金幣: 2118.9
- 散金: 10
- 紅花: 208
- 帖子: 5633
- 在線: 571.6小時
- 蟲號: 1766465
- 注冊: 2012-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)綜合
|
你連接成功量子點沒有？如果沒有的話，我把量子點制備的proteocols發(fā)給你，我最近也在開展量子點方面的實驗，不過不好意思，我可沒有時間量子點制備的proteocols全部譯成中文。 我就樓主提問提示如下： 一、分離鏈霉親和素-量子點和生物素-抗體的聚合體： 1.用分子篩層析分離鏈霉親和素-量子點 和 生物素-抗體的地合體。你的量子點上聯(lián)有鏈霉親和素，抗體上有生物素，這就是一個受體-配體結(jié)合的實驗檢測，方法很多，用分子篩層析可以分離出鏈霉親和素上和生物素-抗體形成的聚合體，先分別用兩者游離狀態(tài)走一遍分子篩層析，然后通過分子量的變化，可以分離出締合體。 我不知道你用的是哪種量子點，一般的話，量子點的直徑已經(jīng)是4-10nm，再加上連接的生物分子，體積更大，用透析或者超濾可能無法只透過量子點，如果孔徑能夠透過量子點，可能蛋白質(zhì)分子也會透過，所以不推薦使用透析或者超濾除去量子點。 2.Pull down分離鏈霉親和素-量子點和生物素-抗體的聚合體。既然量子點-鏈霉親和素結(jié)合到生物素-抗體上，那么你可以直接設(shè)計親和抗體的那種Pull down，可以把鏈霉親和素共價連接到層析柱上。就可以把兩者的聚合體一起從溶液中拽出來。在洗脫到溶液里即可。但是洗脫時會有鏈霉親和素-量子點和生物素-抗體的聚合體被拆解。 3.用超速離心分離鏈霉親和素-量子點 和 生物素-抗體的聚合體可以嘗試，但是超速離心肯定會把一些鏈霉親和素-量子點 和 生物素-抗體的聚合體重新拆解開。 所以推薦分子篩層析。因為你是要分離出來分離鏈霉親和素-量子點 和 生物素-抗體的聚合體，而不是僅僅鑒定離職你跟著發(fā)生了聚合。 二、測定用什么手段檢測量子點結(jié)合了多少抗體？ 當(dāng)然要在第一步分離出來分離 鏈霉親和素-量子點 和 生物素-抗體 的聚合體 之后再來做。 方法有很多種。說一種最簡單的方法： 分子篩層析可以分離出鏈霉親和素-量子點和生物素-抗體形成的聚合體，這步操作可以重復(fù)進(jìn)行，多次混合鏈霉親和素上和生物素-抗體，室溫下溫和攪拌，以便鏈霉親和素上和生物素-抗體形成聚合體，然后走分子篩層析，多操作幾次。提示一下：當(dāng)鏈霉親和素-量子點和生物素-抗體形成聚合體時，鏈霉親和素-量子點 和 生物素-抗體兩種物質(zhì)首先要提純，不然發(fā)生相互作用時干擾巨多。然后用紫外光譜儀測定游離的鏈霉親和素-量子點的熒光強(qiáng)度，除以鏈霉親和素-量子點的分子量，得出單個的鏈霉親和素-量子點的熒光強(qiáng)度，再用熒光光譜儀測定鏈霉親和素-量子點 和 生物素-抗體的熒光強(qiáng)度，是先要測定出生物素-抗體的數(shù)量，然后測定出：用分子篩層析分離出的鏈霉親和素-量子點和生物素-抗體的聚合體的熒光強(qiáng)度，這樣除以單個的鏈霉親和素-量子點的熒光強(qiáng)度，就能知道了量子點結(jié)合了多少抗體。 熒光強(qiáng)度會不會測定？ 不會的話，我告訴你具體方法。因為現(xiàn)在電子書不在我手里，我尚未回家，一會要去聚餐。  還有，我總體上認(rèn)為你的實驗可能走了很大的彎路，我知道量子點的具體用途，你沒有必要即用鏈霉親和素 - 生物素 ，又用抗體，因為抗體本身就可以為量子點在細(xì)胞內(nèi)專一性結(jié)合抗原，而為把量子點帶到特定細(xì)胞內(nèi)位點，如果使細(xì)胞外實驗就更簡單了，要鑒定蛋白質(zhì)或其他生物大分子，不用量子點也可以。你能否說說你的實驗?zāi)康模赡芪铱梢越o你重新設(shè)一下實驗，使你的實驗流程簡單一些。因為我就很懶，絕對不愿意繁瑣的實驗操作。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
1210808010樓2014-07-10 18:06:12
12108080
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1396.3
- 散金: 653
- 紅花: 6
- 帖子: 290
- 在線: 89.4小時
- 蟲號: 1119548
- 注冊: 2010-10-11
- 性別: MM
- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
2樓2013-08-01 20:19:10
conanzzz
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 76 (初中生)
- 金幣: 4633.5
- 散金: 248
- 紅花: 5
- 帖子: 524
- 在線: 383小時
- 蟲號: 818114
- 注冊: 2009-07-29
- 專業(yè): 細(xì)胞生物學(xué)研究中的新方法
3樓2013-08-02 17:29:52
12108080
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1396.3
- 散金: 653
- 紅花: 6
- 帖子: 290
- 在線: 89.4小時
- 蟲號: 1119548
- 注冊: 2010-10-11
- 性別: MM
- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
4樓2013-08-02 19:57:11
12108080
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1396.3
- 散金: 653
- 紅花: 6
- 帖子: 290
- 在線: 89.4小時
- 蟲號: 1119548
- 注冊: 2010-10-11
- 性別: MM
- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
5樓2013-08-02 19:57:48
12108080
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1396.3
- 散金: 653
- 紅花: 6
- 帖子: 290
- 在線: 89.4小時
- 蟲號: 1119548
- 注冊: 2010-10-11
- 性別: MM
- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
8樓2013-08-05 10:29:12
xjk3413
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 524.5
- 帖子: 12
- 在線: 22.2小時
- 蟲號: 3026128
- 注冊: 2014-03-07
- 專業(yè): 電化學(xué)分析
9樓2014-07-10 14:23:19
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 12108080 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 各位老師您好：本人初試372分 +4 | jj涌77 2026-03-25 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +6 | 顧九笙要謙虛 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
材料學(xué)碩，求調(diào)劑
 6+4
|
糖葫蘆888ll 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 086003食品工程求調(diào)劑 +6 | 淼淼111 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | plum李子 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)求調(diào)劑 +6 | Stella_Yao 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085601求調(diào)劑總分293英一數(shù)二 +3 | 鋼鐵大炮 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求導(dǎo)師收 +7 | 天天好運(yùn)來上岸?/a> 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[有機(jī)交流]
 有機(jī)合成求助
20+3
|
FENGSHUJEI 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉大化學(xué)322求調(diào)劑 +4 | 17501029541 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理材料工程348求調(diào)劑 +6 | ￣^￣゜汗 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +4 | LHHL66 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 一志愿東華大學(xué)化學(xué)070300，求調(diào)劑
+7
|
2117205181 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 315分，誠求調(diào)劑，材料與化工085600 +3 | 13756423260 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | .m.. 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0805材料320求調(diào)劑 +3 | 深海物語 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +10 | S.H1 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +9 | 何潤采123 2026-03-18 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +7 | ^O^乜 2026-03-19 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿南理工085701環(huán)境302求調(diào)劑院校 +3 | 葵梓衛(wèi)隊 2026-03-20 | 3/150 |
|