 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 硫酸銨沉淀
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2690 | 回復: 4 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
硫酸銨沉淀
|
|||
| 今天進行硫酸銨沉淀蛋白的實驗。但是在實驗之前我忽視了溶液的ph 問題。再加入硫酸銨進行沉淀時，才注意到自己的容易pH 為12.硫酸銨加入后會釋放氨氣。。我想問這會對我的硫酸銨沉淀蛋白質有影響嗎？ |
回復此樓» 猜你喜歡
307求調劑
已經(jīng)有20人回復
-
285求調劑
已經(jīng)有8人回復
-
材料與化工（0856）304求B區(qū)調劑
已經(jīng)有8人回復
-
370求調劑
已經(jīng)有3人回復
-
070300化學279求調劑
已經(jīng)有5人回復
-
福建理工大學材料學院先進合金團隊招收考研調劑學生
已經(jīng)有4人回復
-
英一數(shù)一408，總分284，二戰(zhàn)真誠求調劑
已經(jīng)有5人回復
-
083000環(huán)境科學與工程調劑，總分281
已經(jīng)有4人回復
-
求調劑
已經(jīng)有3人回復
-
食品工程專碩一志愿中海洋309求調劑
已經(jīng)有10人回復
nanamaka
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 15
- 帖子: 30
- 在線: 6.1小時
- 蟲號: 2563621
- 注冊: 2013-07-24
- 性別: GG
- 專業(yè): 發(fā)育生物學
4樓2013-08-08 21:18:08
【答案】應助回帖
★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
silicare: 金幣+2, 辛苦了 2013-08-07 18:14:32
感謝參與，應助指數(shù) +1
silicare: 金幣+2, 辛苦了 2013-08-07 18:14:32
|
1.鹽析一般是指溶液中加入無機鹽類而使某種物質溶解度降低而析出的過程。如：加濃（NH4）2SO4使蛋白質凝聚的過程；在乙酸的酯化反應中加入飽和碳酸鈉溶液，降低乙酸乙酯溶解度，使其分層現(xiàn)象更明顯的過程。 2.向某些蛋白質溶液中加入某些無機鹽溶液后，可以降低蛋白質的溶解度，使蛋白質凝聚而從溶液中析出,這種作用叫作鹽析，是物理變化，可復原。向某些蛋白質溶液中加入某些重金屬鹽，可以使蛋白質性質發(fā)生改變而凝聚，進而從溶液中析出，這種作用叫作變性，性質改變，是化學反應，無法復原。 3.把動物脂肪或植物油與氫氧化鈉按一定比例放在皂化鍋內攪拌加熱，反應后形成的高級脂肪酸鈉、甘油、水形成混合物。往鍋內加入食鹽顆粒，攪拌、靜置，使高級脂肪酸鈉與甘油、水分離，浮在液面。（該反應用以制肥皂） 簡單的說就是利用高濃度中性鹽使蛋白質發(fā)生沉淀；蛋白質的溶解度（S）不同，用于沉淀的鹽濃度不同。 蛋白鹽析的影響因素 1． 蛋白質的濃度： 中性鹽沉淀蛋白質時，溶液中蛋白質的實際濃度對分離的效果有較大的影響。通常高濃度的蛋白質用稍低的硫酸銨飽和度即可將其沉淀下來，但若蛋白質濃度過高，則易產(chǎn)生各種蛋白質的共沉淀作用，除雜蛋白的效果會明顯下降。對低濃度的蛋白質，要使用更大的硫酸銨飽和度，但共沉淀作用小，分離純化效果較好，但回收率會降低。通常認為比較適中的蛋白質濃度是2.5％～3.0％，相當于25 mg/mL～30mg/mL。 2． 離子強度: 各種蛋白質的沉淀要求不同的離子強度。 3． 鹽的性質： 最有效的鹽是多電荷陰離子。 4． PH值： 一般說來，蛋白質所帶凈電荷越多，它的溶解度就越大。改變pH值可改變蛋白質的帶電性質，因而就改變了蛋白質的溶解度。遠離等電點處溶解度大，在等電點處溶解度小，因此用中性鹽沉淀蛋白質時，pH值常選在該蛋白質的等電點附近。 5． 溫度： 除對溫度敏感的蛋白質在低溫（4度）操作外，一般可在室溫中進行。一般溫度低蛋白質溶介度降低。但有的蛋白質（如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白）在較高的溫度（25度）比0度時溶解度低，更容易鹽析。 6． 蛋白質沉淀后宜在4℃放3小時以上或過夜，以形成較大沉淀而易于分離。鹽析時，分子量較小的蛋白質逐步沉淀下來可能就值得懷疑。具體的蛋白需要具體的摸索，當然，對肽來說，結論也是一樣的。 鹽析結晶原理 鹽析結晶是指在鹽溶液體系中，加入某種電解質鹽析劑, 這種加入的鹽析劑，其離子的水合作用比原溶液中其它鹽較強， 它使溶液中自由水分子數(shù)減小, 從而提高溶液中欲結晶物質在溶液中的有效濃度，使欲結晶物質在溶液中結晶析出， 這就是鹽析結晶。 研究表明，水對陰、陽離子都有較強溶劑化作用，但對陽離子比陰離子有更大的溶劑化作用。因此鹽析劑作用主要表現(xiàn)在鹽析劑陽離子溶劑化作用上。鹽析劑與水結合愈強烈，鹽析效應愈強。由于水合數(shù)與離子的大小有關，即離子愈小，水合數(shù)就愈大，鹽析效應也愈強。鹽析劑所含陽離子半徑愈小，電荷愈多，則對被鹽析離子的水化層影響愈大，使被鹽析離子脫水愈易，其鹽析效應愈強。所以化工生產(chǎn)中常用的鹽析劑多是離子勢較大的陽離子Li+、Al3+、Fe3+、Mg2+、Sn2+等形成的鹽。我們選擇了這些陽離子所形成的氯化物和硝酸鹽, 并通過探索性實驗， 確定選用一種較合適的鹽析劑。 |
2樓2013-08-07 15:22:25
冼亮淀粉酶
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
專家經(jīng)驗: +248 - BioEPI: 73
- 應助: 257 (大學生)
- 貴賓: 0.272
- 金幣: 19479.4
- 散金: 1704
- 紅花: 121
- 帖子: 6591
- 在線: 2779.1小時
- 蟲號: 856414
- 注冊: 2009-09-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學
- 管轄: 微生物
3樓2013-08-07 19:06:05
5樓2013-08-10 11:20:34
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿北化085600材料專碩275|有文章專利｜求調劑 +10 | Micky11223 2026-03-25 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 材料求調劑 一志愿哈工大總分298分，前三科223分 +10 | dongfang59 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
[考研] 285求調劑 +6 | AZMK 2026-03-29 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 346求調劑 一志愿070303有機化學 +7 | 蘿卜燉青菜 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 303求調劑 +7 | DLkz1314. 2026-03-30 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 考研調劑 +5 | Sanmu-124 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 本科211生物醫(yī)學工程085409求調劑339分 +3 | 里子木yy 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 332求92調劑 +8 | 蕉蕉123 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0856材料化工調劑 總分330 +14 | zhubinhao 2026-03-27 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 本科雙非材料，跨考一志愿華電085801電氣，283求調劑，任何專業(yè)都可以 +6 | 芝士雪baoo 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調劑 +7 | 爭取九點睡 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 化學調劑 +4 | 愛吃番茄的旭 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 308求調劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 305求調劑 +5 | 哇盧卡庫 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 315調劑 +4 | 0860求調劑 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調劑 一志愿 本科 北科大 化學 343 +6 | 13831862839 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
材料調劑
 5+4
|
想要一壺桃花水 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境專碩324分求調劑推薦 +5 | 軒小寧—— 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調劑 +3 | 邱gl 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研一志愿蘇州大學初始315（英一）求調劑 +3 | sbdksD 2026-03-24 | 4/200 |
|