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[交流]
且看化學發(fā)光液A液和B液的強強聯(lián)合 已有5人參與
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今天上午隔壁實驗室的小師妹問我化學發(fā)光液是什么東東，鑒于本人也從未接觸過這種試劑，便在元素商城的化工詞典搜索了一下，順便找谷歌同學補充了一些，才得出如下結果： 化學發(fā)光液A液：三氯聯(lián)吡啶釕[Rubpy3]2+絡合物 B液：三丙胺Tripropylamine,TPA，應用于電化學發(fā)光法（ECL）（以雙抗體夾心法為例），其原理為化學發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕［Ru（bpy）3］2+ 和電子供體三丙胺（TPA）在陽電極表面可同時失去一個電子而發(fā)生氧化反應。二價［Ru（bpy）3］2+ 被氧化成三價強氧化劑。TPA失去電子后被氧化成陽離子自由基TPA + ，其不穩(wěn)定，可自發(fā)地失去一個質(zhì)子（H+），形成自由基TPA，變?yōu)閺娺�原劑，可將一個電子遞給三價的［Ru（bpy）3］3+ 使其形成激發(fā)態(tài)的［Ru（bpy）3］2+ 。激發(fā)態(tài)的三聯(lián)吡啶釕不穩(wěn)定，很快發(fā)射出一個波長620nm的光子，回復成基態(tài)的三聯(lián)吡啶釕。這個過程可以在電極表面周而復始地進行，產(chǎn)生許多光子，使信號增強.將待測樣本與包被的順磁性微粒和發(fā)光劑標記的抗體加在反應杯中共同溫育，形成磁性微珠包被抗體-抗原-反光劑標記抗體復合物。將復合物吸入流動室，同時用TPA緩沖液沖洗。當磁性微粒流經(jīng)電極表面時，被安裝在電極下面的磁鐵吸引住，而游離的發(fā)光劑標記抗體被沖走。同時在電極加電壓，啟動ECL反應，使[Ru（bpy）3]2+ 和TPA在電極表面進行電子轉移，產(chǎn)生電化學發(fā)光。光的強度與待測抗原的濃度成正比。如有不同看法，望您不吝賜教。 [ Last edited by ysmall on 2013-8-15 at 13:14 ] |
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