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且看化學(xué)發(fā)光液A液和B液的強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合 已有5人參與
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今天上午隔壁實(shí)驗(yàn)室的小師妹問我化學(xué)發(fā)光液是什么東東，鑒于本人也從未接觸過這種試劑，便在元素商城的化工詞典搜索了一下，順便找谷歌同學(xué)補(bǔ)充了一些，才得出如下結(jié)果： 化學(xué)發(fā)光液A液：三氯聯(lián)吡啶釕[Rubpy3]2+絡(luò)合物 B液：三丙胺Tripropylamine,TPA，應(yīng)用于電化學(xué)發(fā)光法（ECL）（以雙抗體夾心法為例），其原理為化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕［Ru（bpy）3］2+ 和電子供體三丙胺（TPA）在陽電極表面可同時(shí)失去一個(gè)電子而發(fā)生氧化反應(yīng)。二價(jià)［Ru（bpy）3］2+ 被氧化成三價(jià)強(qiáng)氧化劑。TPA失去電子后被氧化成陽離子自由基TPA + ，其不穩(wěn)定，可自發(fā)地失去一個(gè)質(zhì)子（H+），形成自由基TPA，變?yōu)閺?qiáng)還原劑，可將一個(gè)電子遞給三價(jià)的［Ru（bpy）3］3+ 使其形成激發(fā)態(tài)的［Ru（bpy）3］2+ 。激發(fā)態(tài)的三聯(lián)吡啶釕不穩(wěn)定，很快發(fā)射出一個(gè)波長(zhǎng)620nm的光子，回復(fù)成基態(tài)的三聯(lián)吡啶釕。這個(gè)過程可以在電極表面周而復(fù)始地進(jìn)行，產(chǎn)生許多光子，使信號(hào)增強(qiáng).將待測(cè)樣本與包被的順磁性微粒和發(fā)光劑標(biāo)記的抗體加在反應(yīng)杯中共同溫育，形成磁性微珠包被抗體-抗原-反光劑標(biāo)記抗體復(fù)合物。將復(fù)合物吸入流動(dòng)室，同時(shí)用TPA緩沖液沖洗。當(dāng)磁性微粒流經(jīng)電極表面時(shí)，被安裝在電極下面的磁鐵吸引住，而游離的發(fā)光劑標(biāo)記抗體被沖走。同時(shí)在電極加電壓，啟動(dòng)ECL反應(yīng)，使[Ru（bpy）3]2+ 和TPA在電極表面進(jìn)行電子轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生電化學(xué)發(fā)光。光的強(qiáng)度與待測(cè)抗原的濃度成正比。如有不同看法，望您不吝賜教。 [ Last edited by ysmall on 2013-8-15 at 13:14 ] |
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