 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 635 | 回復(fù): 2 | |||
xiao7867金蟲 (初入文壇)
|
[求助]
重疊pcr
|
|
本人做重疊pcr，引物結(jié)合部位是30bp，完全互補(bǔ)，用pfu酶第一輪pcr結(jié)果大概是1000bp，條帶清晰正確，切膠回收，測(cè)過濃度之后，將其稀釋到10ng/ul做模板，用50ul體系各加1ul做模板，溫度梯度也做了，pcr結(jié)果老是只有一條鏈的長(zhǎng)度，要不就是彌散的。 請(qǐng)我一下：重疊pcr是和平常的pcr一樣做嗎？還是想有人說的先做3-5各循環(huán)，然后再加入兩端引物呢？？？ 退火的溫度與互補(bǔ)的引物Tm值之間有什么關(guān)系嗎？ 模板量大概是多少呢？ 做了一個(gè)暑假了，就卡在這個(gè)問題上了，快郁悶死了！ 請(qǐng)做過的朋友不吝賜教，先謝謝哈�。。� |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有274人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有3人回復(fù)
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiao7867: 金幣+2 2013-08-18 10:35:30
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiao7867: 金幣+2 2013-08-18 10:35:30
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
2樓2013-08-18 09:11:55
snoopyzxx
木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 4
- 應(yīng)助: 49 (小學(xué)生)
- 金幣: 3232.6
- 散金: 1266
- 紅花: 43
- 帖子: 2256
- 在線: 276.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 548497
- 注冊(cè): 2008-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 全球變化生態(tài)學(xué)
★ ★ ★
amisking: 回帖置頂 2013-08-18 16:37:51
xiao7867(amisking代發(fā)): 金幣+3, 感謝發(fā)帖應(yīng)助，幫助蟲子 2013-08-18 16:38:03
amisking: 回帖置頂 2013-08-18 16:37:51
xiao7867(amisking代發(fā)): 金幣+3, 感謝發(fā)帖應(yīng)助，幫助蟲子 2013-08-18 16:38:03
|
重疊PCR的第一輪PCR應(yīng)該兩個(gè)獨(dú)立的PCR，產(chǎn)生兩個(gè)產(chǎn)物，這一輪要用到引物。 第二輪是以第一輪的產(chǎn)物混合PCR，互為引物，不加另外的引物，第二輪循環(huán)數(shù)可以適當(dāng)減少。 OE-PCR進(jìn)行點(diǎn)突變.jpg SOE-PCR進(jìn)行片段拼接.jpg |
3樓2013-08-18 09:53:31
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 xiao7867 的主題更新
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 083000環(huán)境科學(xué)與工程調(diào)劑，總分281 +4 | 橙子（勝意） 2026-03-30 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +8 | Y-cap 2026-03-29 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +8 | 十閑wx 2026-03-24 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +5 | 小卡不卡. 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703一志愿9，初試成績(jī)：338，四六級(jí)已過，有科研經(jīng)歷，求調(diào)劑！ +7 | Zuhui0306 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085404求調(diào)劑，總分309，本科經(jīng)歷較為豐富 +6 | 來財(cái)aa 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥調(diào)劑 +5 | Feisty。 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085600，專業(yè)課化工原理，321分求調(diào)劑 +5 | 大饞小子 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +8 | RuiFairyrui 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 11408軟件工程求調(diào)劑 +3 | Qiu學(xué)ing 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | 爭(zhēng)取九點(diǎn)睡 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 312，生物學(xué)求調(diào)劑 +3 | 小譯同學(xué)abc 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +3 | raojunqi0129 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 蘆lty 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑，一志愿南農(nóng)083200食品科學(xué)與工程 +5 | XQTJZ 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 351求調(diào)劑 +4 | 麥克阿磊 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑一志愿上海交通大學(xué)336分-本科上海211 +4 | 小魚愛有機(jī) 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研一志愿蘇州大學(xué)初始315（英一）求調(diào)劑 +3 | sbdksD 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求b區(qū)院校調(diào)劑 +4 | 周56 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +7 | 加一一九 2026-03-24 | 7/350 |
|