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nanqihao1985銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
Rnase在室溫下多久會(huì)失活？
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| 最近抽提組織RNA，經(jīng)常發(fā)生降解，想問(wèn)下Rnase也是一種蛋白，周圍環(huán)境中的Rnase多久降解失活呢，還是說(shuō)很難失活？有沒(méi)有具體的文獻(xiàn)研究啊，非常感謝 |
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nanqihao1985
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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2樓2013-08-18 16:29:01
xingjiuwcc
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3樓2013-08-18 17:46:10
4樓2013-08-18 22:39:49
Abs_Zero
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5樓2013-08-18 22:56:17
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6樓2013-08-19 07:27:19
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 一般大家提取RNA, 都認(rèn)為是環(huán)境里面的RNase會(huì)對(duì)提取過(guò)程造成很大的影響。其實(shí)只要你稍微注意一點(diǎn)，外援的一般不回造成很大的影響，原因是提取過(guò)程中不論是研磨過(guò)程中的液氮還是直接用裂解液，他們都具有非常強(qiáng)的蛋白失火能力，不管什么蛋白在這些條件下基本上會(huì)迅速每有活性。因此RNA的明顯講解一般肯定不來(lái)自于環(huán)境或者器皿上可能存在的微量RNase。 真正的具有極大危險(xiǎn)的是細(xì)胞內(nèi)的酶。細(xì)胞破碎以后， 如果液氮揮發(fā)過(guò)快，材料溫度回升，或者是磨碎了以后裂解液加少了沒(méi)有迅速充分的溶解材料，那么內(nèi)源的大量Rnase可能迅速的就把Rnase給降解了。所以大家更應(yīng)該注意的是提取過(guò)程中，不要出現(xiàn)研磨過(guò)程中大的溫度變化，也不要多家材料導(dǎo)致裂解液不夠，并且材料和裂解液混合要迅速充分，做到了這些一般都不會(huì)出現(xiàn)很顯著的降解。 |
7樓2013-08-19 09:22:01
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