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nanqihao1985銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
Rnase在室溫下多久會失活?
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| 最近抽提組織RNA,經(jīng)常發(fā)生降解,想問下Rnase也是一種蛋白,周圍環(huán)境中的Rnase多久降解失活呢,還是說很難失活?有沒有具體的文獻研究啊,非常感謝 |

銀蟲 (小有名氣)

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金蟲 (小有名氣)
| 一般大家提取RNA, 都認為是環(huán)境里面的RNase會對提取過程造成很大的影響。其實只要你稍微注意一點,外援的一般不回造成很大的影響,原因是提取過程中不論是研磨過程中的液氮還是直接用裂解液,他們都具有非常強的蛋白失火能力,不管什么蛋白在這些條件下基本上會迅速每有活性。因此RNA的明顯講解一般肯定不來自于環(huán)境或者器皿上可能存在的微量RNase。 真正的具有極大危險的是細胞內的酶。細胞破碎以后, 如果液氮揮發(fā)過快,材料溫度回升,或者是磨碎了以后裂解液加少了沒有迅速充分的溶解材料,那么內源的大量Rnase可能迅速的就把Rnase給降解了。所以大家更應該注意的是提取過程中,不要出現(xiàn)研磨過程中大的溫度變化,也不要多家材料導致裂解液不夠,并且材料和裂解液混合要迅速充分,做到了這些一般都不會出現(xiàn)很顯著的降解。 |
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