zhwhhxx

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[求助] 關(guān)于單抗制備

各位高手，本人目前在做小分子單抗方面的實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過程中，發(fā)現(xiàn)免疫小鼠后，小鼠的血清中抗體檢測呈陽性，但是與所用的小分子物質(zhì)沒有競爭，敬請各位指點(diǎn)迷津

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1樓 2013-08-20 09:27:39

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zhaoxr0311

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你這個(gè)問題就屬于跟標(biāo)準(zhǔn)品沒有特異性反應(yīng)，建議改變結(jié)構(gòu)，再次免疫！跟你推薦一下北京勤邦生物技術(shù)有限公司做的小分子抗體挺好的，我之前就是怎么連都不反應(yīng)，然后交給他們做就出來了。

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2樓2013-08-28 16:40:45

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zhwhhxx

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2樓: Originally posted by zhaoxr0311 at 2013-08-28 16:40:45
你這個(gè)問題就屬于跟標(biāo)準(zhǔn)品沒有特異性反應(yīng)，建議改變結(jié)構(gòu)，再次免疫！跟你推薦一下北京勤邦生物技術(shù)有限公司做的小分子抗體挺好的，我之前就是怎么連都不反應(yīng)，然后交給他們做就出來了。

改變結(jié)構(gòu)，是指改變修飾方法嗎？我做的是異喹啉類生物堿的單抗，這個(gè)化合物上有一個(gè)酚羥基，于是我就想在酚羥基上連一個(gè)丁二酸酐，然后再和蛋白偶聯(lián)。不知大俠還有沒有其他可以指點(diǎn)的，比如說，新的偶聯(lián)方法？

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3樓2013-08-29 14:06:29

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ty10086

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zhwhhxx: 金幣+2, ★★★很有幫助 2013-08-31 20:37:24

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3樓: Originally posted by zhwhhxx at 2013-08-29 14:06:29
改變結(jié)構(gòu)，是指改變修飾方法嗎？我做的是異喹啉類生物堿的單抗，這個(gè)化合物上有一個(gè)酚羥基，于是我就想在酚羥基上連一個(gè)丁二酸酐，然后再和蛋白偶聯(lián)。不知大俠還有沒有其他可以指點(diǎn)的，比如說，新的偶聯(lián)方法？...

“小鼠的血清中抗體檢測呈陽性，但是與所用的小分子物質(zhì)沒有競爭”
陽性從何而來？
你的結(jié)構(gòu)不合適現(xiàn)在。
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4樓2013-08-29 21:49:49

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zhwhhxx: 金幣+2, ★★★很有幫助 2013-08-31 20:37:39

引用回帖:

4樓: Originally posted by ty10086 at 2013-08-29 21:49:49
“小鼠的血清中抗體檢測呈陽性，但是與所用的小分子物質(zhì)沒有競爭”
陽性從何而來？
你的結(jié)構(gòu)不合適現(xiàn)在。
回復(fù)更多。...

陽性說明的是抗原本身有免疫原性，能產(chǎn)生抗體。與小分子物質(zhì)沒有競爭就是連接的位點(diǎn)不對，可以試試同時(shí)多個(gè)位點(diǎn)連接，免疫，會(huì)有有抑制情況的，一般情況，不可能你連接的位點(diǎn)就有抑制，這需要經(jīng)驗(yàn)。其實(shí)這也是我在勤邦生物的同學(xué)告訴我的，你可以咨詢一下他們。

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5樓2013-08-30 08:26:09

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5樓: Originally posted by zhaoxr0311 at 2013-08-30 08:26:09
陽性說明的是抗原本身有免疫原性，能產(chǎn)生抗體。與小分子物質(zhì)沒有競爭就是連接的位點(diǎn)不對，可以試試同時(shí)多個(gè)位點(diǎn)連接，免疫，會(huì)有有抑制情況的，一般情況，不可能你連接的位點(diǎn)就有抑制，這需要經(jīng)驗(yàn)。其實(shí)這也是我在 ...

嗯，謝謝大俠了

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6樓2013-08-31 20:38:10

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一步一步

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你偶聯(lián)的是異喹啉類生物堿小分子，該類小分子的結(jié)構(gòu)應(yīng)該還算復(fù)雜，所以其免疫原性應(yīng)該是沒有太大問題的。
現(xiàn)在需要懷疑的是你到底有沒有將小分子成功偶聯(lián)到載體蛋白？
檢測方法：
1. 如果小分子在全波長下有吸收，可以通過全波長掃描來定性確定小分子與載體蛋白是否成功偶聯(lián)。
很大的可能性是小分子沒有偶聯(lián)到載體蛋白上。

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7樓2013-09-01 16:10:33

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7樓: Originally posted by 一步一步 at 2013-09-01 16:10:33
你偶聯(lián)的是異喹啉類生物堿小分子，該類小分子的結(jié)構(gòu)應(yīng)該還算復(fù)雜，所以其免疫原性應(yīng)該是沒有太大問題的。
現(xiàn)在需要懷疑的是你到底有沒有將小分子成功偶聯(lián)到載體蛋白？
檢測方法：
1. 如果小分子在全波長下有吸收 ...

嗯，是的，已經(jīng)測過了，好像沒有連上，謝謝各位大俠了。

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8樓2013-09-02 10:45:34

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