 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (3069)
- >導(dǎo)師招生 (293)
- >考研 (263)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (126)
- >文獻(xiàn)求助 (96)
- >基金申請(qǐng) (62)
- >休閑灌水 (58)
- >教師之家 (42)
- >考博 (40)
- >招聘信息布告欄 (36)
- >碩博家園 (30)
- >論文道賀祈福 (27)
- >論文投稿 (24)
- >無(wú)機(jī)/物化 (22)
- >留學(xué)生活 (19)
- >博后之家 (18)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2625 | 回復(fù): 11 | ||||
lesirenuse新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
gateway BP反應(yīng)涂板沒(méi)有菌長(zhǎng)出來(lái) 已有1人參與
|
|||
|
最近在做gateway，有一個(gè)入門(mén)載體已經(jīng)測(cè)序正確了。之后LR反應(yīng)，涂板后有兩個(gè)單克隆，都是假陽(yáng)性的。之后再涂板，就沒(méi)有菌長(zhǎng)出來(lái)了。 另外兩個(gè)BP反應(yīng)后涂板，也沒(méi)有菌長(zhǎng)出來(lái)。片段都在2k以下。確定抗性沒(méi)有弄錯(cuò) 求大神相助，折騰了一周了。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
312求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
化學(xué)工程321分求調(diào)劑
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
280求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
266求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
工科材料085601 279求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
環(huán)境工程調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
302求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
297求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
298-一志愿中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)-求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
焦慮
已經(jīng)有10人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- T載體轉(zhuǎn)化DH5之后涂板長(zhǎng)不出來(lái)是什么原因啊
已經(jīng)有5人回復(fù)
starseacow
專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
-
專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +426 - BioEPI: 7
- 應(yīng)助: 1217 (講師)
- 金幣: 9097.3
- 散金: 16445
- 紅花: 226
- 帖子: 4669
- 在線: 2320.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1136974
- 注冊(cè): 2010-11-02
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生理與生化
- 管轄: 動(dòng)植物
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
silicare: 金幣+2, 應(yīng)助指數(shù)+1, 謝謝分享 2013-10-21 08:22:36
silicare: 金幣+2, 應(yīng)助指數(shù)+1, 謝謝分享 2013-10-21 08:22:36
|
http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=4409532 見(jiàn)我發(fā)的資料，其中兩個(gè)是gateway的說(shuō)明書(shū) |
8樓2013-10-20 01:11:54
starseacow
專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
-
專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +426 - BioEPI: 7
- 應(yīng)助: 1217 (講師)
- 金幣: 9097.3
- 散金: 16445
- 紅花: 226
- 帖子: 4669
- 在線: 2320.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1136974
- 注冊(cè): 2010-11-02
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物生理與生化
- 管轄: 動(dòng)植物
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
137167741: 金幣+1, 小木蟲(chóng)交流，共同進(jìn)步~~ 2013-10-20 02:56:22
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
137167741: 金幣+1, 小木蟲(chóng)交流，共同進(jìn)步~~ 2013-10-20 02:56:22
| entry clone在做LR反應(yīng)前最好進(jìn)行PEG純化，否則反應(yīng)效率太低。正常LR反應(yīng)應(yīng)保證EC和vector都在100 ng以上，一切順利，估計(jì)可以長(zhǎng)出成百上千個(gè)菌落。 |
lesirenuse2樓2013-08-22 21:19:31
lesirenuse
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 43
- 帖子: 11
- 在線: 5.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1212874
- 注冊(cè): 2011-02-25
- 專(zhuān)業(yè): 觀賞園藝學(xué)
3樓2013-08-23 18:11:03
Sthunder
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- BioEPI: 3
- 應(yīng)助: 130 (高中生)
- 金幣: 2337.8
- 散金: 15
- 紅花: 9
- 帖子: 308
- 在線: 176.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2551016
- 注冊(cè): 2013-07-17
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lesirenuse(silicare代發(fā)): 金幣+5, 謝謝參與 2013-10-21 08:21:55
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lesirenuse(silicare代發(fā)): 金幣+5, 謝謝參與 2013-10-21 08:21:55
| 沒(méi)那么玄乎哈，我們做BP的時(shí)候直接將PCR加入到反應(yīng)體系中都能出來(lái)，LR的時(shí)候直接用kit提取的載體，就能搞定，而且我們每個(gè)反應(yīng)都是只加1微升的酶。根據(jù)我的經(jīng)驗(yàn)，做gateway的時(shí)候關(guān)鍵是濃度問(wèn)題，尤其是PCR產(chǎn)物or pZEO，可以低點(diǎn)，但千萬(wàn)別高，Good luck！ |
4樓2013-08-23 22:27:11
lesirenuse
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 43
- 帖子: 11
- 在線: 5.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1212874
- 注冊(cè): 2011-02-25
- 專(zhuān)業(yè): 觀賞園藝學(xué)
5樓2013-08-25 10:51:00
xingkong0660
銀蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 642.8
- 帖子: 131
- 在線: 109.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1905489
- 注冊(cè): 2012-07-22
- 專(zhuān)業(yè): 作物分子育種
6樓2013-09-04 09:34:27
litterone123
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1247.6
- 紅花: 2
- 帖子: 23
- 在線: 18.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 922276
- 注冊(cè): 2009-12-07
- 專(zhuān)業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
太感謝了。 7樓2013-10-19 23:12:08
litterone123
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1247.6
- 紅花: 2
- 帖子: 23
- 在線: 18.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 922276
- 注冊(cè): 2009-12-07
- 專(zhuān)業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
9樓2013-10-20 21:57:18
天地一微塵
鐵桿木蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 26 (小學(xué)生)
- 金幣: 7139.6
- 紅花: 2
- 帖子: 114
- 在線: 117.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3406899
- 注冊(cè): 2014-09-10
- 專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)
10樓2015-03-11 16:59:45
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 lesirenuse 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 化學(xué)工程321分求調(diào)劑 +13 | 大米飯！ 2026-03-15 | 16/800 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 陽(yáng)陽(yáng)哇塞 2026-03-14 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +4 | 戲精丹丹丹 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 298-一志愿中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)-求調(diào)劑 +4 | 手機(jī)用戶 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +8 | 一定有學(xué)上- 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +6 | 世界首富 2026-03-11 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 【0856】化學(xué)工程（085602）313 分，本科學(xué)科評(píng)估A類(lèi)院�；瘜W(xué)工程與工藝，誠(chéng)求調(diào)劑 +7 | 小劉快快上岸 2026-03-11 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +3 | Yy7400 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +3 | 聽(tīng)風(fēng)就是雨； 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 機(jī)械專(zhuān)碩調(diào)劑
+3
|
笨笨兔子 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考博] 東華理工大學(xué)化材專(zhuān)業(yè)26屆碩士博士申請(qǐng) +6 | zlingli 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑 +3 | Zys010410@ 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +4 | 威化餅07 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)]
有必要更換申報(bào)口嗎
 20+3
|
fannyamoy 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] ［0860］321分求調(diào)劑，ab區(qū)皆可 +4 | 寶貴熱 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | 芬達(dá)46 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +3 | 小匕仔汁 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 277求調(diào)劑 +4 | anchor17 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 福州大學(xué)楊黃浩課題組招收2026年專(zhuān)業(yè)學(xué)位博士研究生，2026.03.20截止 +3 | Xiangyu_ou 2026-03-12 | 3/150 |
|