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[求助]
求教G418篩選相關(guān)問題！�。。�
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| 各種蟲友：本人第一次做真核表達(dá)，要用到G418篩選CHO細(xì)胞，這幾天打算做G418的殺滅曲線確定抗生素的篩選濃度，按照查到的方法，200個(gè)細(xì)胞/孔鋪96孔板，過了一天發(fā)現(xiàn)細(xì)胞沒有貼壁，做的時(shí)候原始細(xì)胞濃度為3.04乘以10的6次方，最終稀釋到2乘以10的3次方，每個(gè)孔加了100微升，而且由于是第一次做從消化到最終鋪板耗費(fèi)了1 h，是不是因?yàn)檫@個(gè)原因所以細(xì)胞狀態(tài)不好就不貼壁？我的操作過程是不是存在什么問題？還有這個(gè)操作需要注意些什么？請大家指教�。�！還有我看到是轉(zhuǎn)染前細(xì)胞的接種量是4乘以10的5次方/孔，想請教這個(gè)200個(gè)細(xì)胞/孔和4乘以10的5次方個(gè)細(xì)胞/孔，這2個(gè)數(shù)據(jù)是怎么確定的？這2者之間的關(guān)系是怎么樣的？新手操作，問題多多，還請大家說的詳細(xì)點(diǎn)兒，O(∩_∩)O~ |
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