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liuqingrui5金蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白質(zhì)鑒定
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純化的蛋白質(zhì)經(jīng)二級(jí)質(zhì)譜鑒定后搜庫得到匹配蛋白,那么這兩個(gè)蛋白就是同一個(gè)蛋白嗎,性質(zhì)就完全一樣嗎?其氨基酸序列就100%相同嗎? 另外,怎么知道純化出來的蛋白的氨基酸序列?要全部測(cè)序嗎??jī)r(jià)格貴嗎?分子量大概為55kDa |
| 不是同一個(gè)蛋白,只能說是同一類蛋白,這兩個(gè)蛋白在氨基酸組成上很相似,因此這兩個(gè)蛋白的有些性質(zhì)可能相同,要知道純化出來的蛋白的氨基酸序列,全部測(cè)序是不可能的,你可以對(duì)這個(gè)蛋白進(jìn)行N端和C端測(cè)序,各測(cè)十幾個(gè)氨基酸,然后跟據(jù)所測(cè)的氨基酸序列反推基因編碼序列,與已有的全基基組測(cè)序結(jié)果或基因組文庫的測(cè)序結(jié)果進(jìn)行比對(duì)分析來推測(cè)編碼該蛋白的基因,再跟據(jù)推測(cè)的全長(zhǎng)基因推導(dǎo)出蛋白質(zhì)的氨基酸序列。以上還只是推測(cè)的,如果要進(jìn)一步確認(rèn)的話,可以跟據(jù)推測(cè)的基因序列,設(shè)計(jì)PCR引物,然后擴(kuò)增基因,進(jìn)行基因克隆和表達(dá),對(duì)表達(dá)的蛋白進(jìn)行分析來進(jìn)一步確認(rèn)該基因確實(shí)是編碼該蛋白的基因,從而使推導(dǎo)的氨基酸序列更具備說服力。 |
金蟲 (小有名氣)
金蟲 (小有名氣)
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