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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 蛋白質鑒定
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liuqingrui5金蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白質鑒定
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純化的蛋白質經二級質譜鑒定后搜庫得到匹配蛋白，那么這兩個蛋白就是同一個蛋白嗎，性質就完全一樣嗎？其氨基酸序列就100%相同嗎？ 另外，怎么知道純化出來的蛋白的氨基酸序列？要全部測序嗎？價格貴嗎？分子量大概為55kDa |
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【答案】應助回帖
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kx444555: 金幣+5, 鼓勵交流 2013-09-04 16:35:50
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kx444555: 金幣+5, 鼓勵交流 2013-09-04 16:35:50
| 不是同一個蛋白，只能說是同一類蛋白，這兩個蛋白在氨基酸組成上很相似，因此這兩個蛋白的有些性質可能相同，要知道純化出來的蛋白的氨基酸序列，全部測序是不可能的，你可以對這個蛋白進行N端和C端測序，各測十幾個氨基酸，然后跟據所測的氨基酸序列反推基因編碼序列，與已有的全基基組測序結果或基因組文庫的測序結果進行比對分析來推測編碼該蛋白的基因，再跟據推測的全長基因推導出蛋白質的氨基酸序列。以上還只是推測的，如果要進一步確認的話，可以跟據推測的基因序列，設計PCR引物，然后擴增基因，進行基因克隆和表達，對表達的蛋白進行分析來進一步確認該基因確實是編碼該蛋白的基因，從而使推導的氨基酸序列更具備說服力。 |
liuqingrui52樓2013-09-04 15:47:52
liuqingrui5
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4樓2013-10-18 16:26:39
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