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2008101111金蟲 (正式寫手)
學(xué)術(shù)江湖混子
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[求助]
[求助/交流]如何提高自己DIY的柱式膠回收試劑盒的回收效率?
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最近自己搜集了柱式膠回收試劑盒各個溶劑的配方,經(jīng)過幾輪的試驗,總算能夠回收到PCR產(chǎn)物,但是回收的效率估計只有50%左右,敢問各位有沒有好的建議和方法來提高一下回收效率?或者有更好的配方給我建議一下? |
分子生化實驗經(jīng)驗積累 |

銅蟲 (小有名氣)
榮譽版主 (著名寫手)
![]() |
專家經(jīng)驗: +24 |

金蟲 (正式寫手)
學(xué)術(shù)江湖混子

木蟲 (正式寫手)
| 我感覺樓主的回收效率已經(jīng)很高了。但以前做的時候想到的提高效率的也就幾個方面:1.溶膠。這一部分可以適當(dāng)提高溫度。2.上柱。由于是高鹽結(jié)合,低鹽洗脫,適當(dāng)提高鹽濃度應(yīng)該有利(推測)3.洗脫。我以前一直用純水洗脫而且一定要65到70攝氏度水浴,適當(dāng)延長時間。估計這步是影響收率的關(guān)鍵。由于洗脫體積一般都很小30~50ul,柱心和邊緣的洗脫效果是不同的,適當(dāng)加大洗脫體積會提高總收率,但濃度下降。重復(fù)洗脫的作用是有的但不明顯。能想到的就這些。僅供樓主參考。 |
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