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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 引物設計
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Apollo919新蟲 (初入文壇)
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引物設計
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CCTTCAAACACCAATCGCGAGCTGCCAAGCTAAAATACTTGTCAGCTCACGATGTAAAAATTTAGCGAAG TTTTCACAATTTATGATTCTATTTCTCGCATTTACTGTTATAATATTTACTGTATCAATATATAGGAGGA ATTTTTGTAATGAAAATTATTGCATATGCTGTACGTGATGACGAACGTCCATTCTTCGATACTTGGATGA AAGAAAACCCAGATGTTGAAGTTAAATTAGTTCCAGAATTACTTACTGAAGACAACGTTGACTTAGCTAA AGGCTTCGACGGTGCCGATGTATACCAACAAAAGGACTATACTGCTGAAGTATTGAACAAGTTAGCCGAC GAAGGGGTTAAGAACATCTCTCTTCGTAACGTTGGTGTTGATAACTTGGACGTTCCTACTGTTAAAGCAC GTGGCTTAAACATTTCTAACGTACCTGCATACTCACCAAATGCGATTGCTGAATTATCAGTAACGCAATT GATGCAATTATTACGTCAAACCCCATTGTTCAACAAGAAGTTAGCTAAGCAAGACTTCCGTTGGGCACCA GATATTGCCAAGGAATTAAACACCATGACTGTTGGTGTTATCGGTACTGGTCGGATTGGCCGTGCTGCCA TCGATATTTTCAAAGGCTTCGGCGCTAAGGTTATCGGTTACGATGTTTACCGGAATGCTGAACTTGAAAA GGAAGGCATGTACGTTGACACCTTGGACGAATTATACGCCCAAGCTGATGTTATCACGTTACACGTTCCT GCATTGAAGGATAACTACCACATGTTGAATGCGGATGCCTTCAGCAAGATGAAAGATGGCGCCTACATCT TGAACTTTGCTCGTGGGACACTCATCGATTCAGAAGACTTGATCAAAGCCTTAGACAGTGGCAAAGTTGC CGGTGCCGCTCTTGATACGTATGAATACGAAACTAAGATCTTCAACAAAGACCTTGAAGGTCAAACGATT GATGACAAGGTCTTCATGAACTTGTTCAACCGCGACAATGTTTTGATTACACCACATACGGCTTTCTACA CTGAAACTGCCGTTCACAACATGGTGCACGTTTCAATGAACAGTAACAAACAATTCATCGAAACTGGTAA AGCTGACACACAAGTTAAGTTTGATTAATCTCGATTATCACTGAAAATGGCGTCACTCATCTGAGTGACG CCATTTTTTATGCTTTCACCTAAATGGGGCCTTTTCGAAGCGTTAACCCCAAGCGTACTTTCAATGCTGT TATTATCCATAACAAAAAGCCCACAATAGAGCTGGTTGC 編碼目標蛋白是從150-1145共996bp 332個氨基酸 想在5‘端加BamH I 在3’端加Hind III 求各路大俠設計下 不勝感激 [ Last edited by Apollo919 on 2013-9-16 at 21:20 ] |
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yimingwang
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D-lactate dehydrogenase 括號內是引物，閱讀框自己矯正。 (GGATCC-ATGAAAATTATTGCATATGCTGTA) CGTGATGACGAACGTCCATTCTTCGATACTTGGATGAAAGAAAACCCAGATGTTGAAGTTAAATTAGTTCCAGAATTACTTACTGAAGACAACGTTGACTTAGCTAAAGGCTTCGACGGTGCCGATGTATACCAACAAAAGGACTATACTGCTGAAGTATTGAACAAGTTAGCCGACGAAGGGGTTAAGAACATCTCTCTTCGTAACGTTGGTGTTGATAACTTGGACGTTCCTACTGTTAAAGCACGTGGCTTAAACATTTCTAACGTACCTGCATACTCACCAAATGCGATTGCTGAATTATCAGTAACGCAATTGATGCAATTATTACGTCAAACCCCATTGTTCAACAAGAAGTTAGCTAAGCAAGACTTCCGTTGGGCACCAGATATTGCCAAGGAATTAAACACCATGACTGTTGGTGTTATCGGTACTGGTCGGATTGGCCGTGCTGCCATCGATATTTTCAAAGGCTTCGGCGCTAAGGTTATCGGTTACGATGTTTACCGGAATGCTGAACTTGAAAAGGAAGGCATGTACGTTGACACCTTGGACGAATTATACGCCCAAGCTGATGTTATCACGTTACACGTTCCTGCATTGAAGGATAACTACCACATGTTGAATGCGGATGCCTTCAGCAAGATGAAAGATGGCGCCTACATCTTGAACTTTGCTCGTGGGACACTCATCGATTCAGAAGACTTGATCAAAGCCTTAGACAGTGGCAAAGTTGCCGGTGCCGCTCTTGATACGTATGAATACGAAACTAAGATCTTCAACAAAGACCTTGAAGGTCAAACGATTGATGACAAGGTCTTCATGAACTTGTTCAACCGCGACAATGTTTTGATTACACCACATACGGCTTTCTACACTGAAACTGCCGTTCACAACATGGTGCACGTTTCAATGAACAGTAACAAACAATTCATCGAAACTGGTAA (AGCTGACACACAAGTTAAGTTTGAT-AAGCTT) |
3樓2013-09-16 22:32:07
Apollo919
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ATGAAAATTATTGCATATGCTGTACGTGATGACGAACGTCCATTCTTCGATACTTGGATGAAAGAAAACCCAGATGTTGAAGTTAAATTAGTTCCAGAATTACTTACTGAAGACAACGTTGACTTAGCTAAAGGCTTCGACGGTGCCGATGTATACCAACAAAAGGACTATACTGCTGAAGTATTGAACAAGTTAGCCGACGAAGGGGTTAAGAACATCTCTCTTCGTAACGTTGGTGTTGATAACTTGGACGTTCCTACTGTTAAAGCACGTGGCTTAAACATTTCTAACGTACCTGCATACTCACCAAATGCGATTGCTGAATTATCAGTAACGCAATTGATGCAATTATTACGTCAAACCCCATTGTTCAACAAGAAGTTAGCTAAGCAAGACTTCCGTTGGGCACCAGATATTGCCAAGGAATTAAACACCATGACTGTTGGTGTTATCGGTACTGGTCGGATTGGCCGTGCTGCCATCGATATTTTCAAAGGCTTCGGCGCTAAGGTTATCGGTTACGATGTTTACCGGAATGCTGAACTTGAAAAGGAAGGCATGTACGTTGACACCTTGGACGAATTATACGCCCAAGCTGATGTTATCACGTTACACGTTCCTGCATTGAAGGATAACTACCACATGTTGAATGCGGATGCCTTCAGCAAGATGAAAGATGGCGCCTACATCTTGAACTTTGCTCGTGGGACACTCATCGATTCAGAAGACTTGATCAAAGCCTTAGACAGTGGCAAAGTTGCCGGTGCCGCTCTTGATACGTATGAATACGAAACTAAGATCTTCAACAAAGACCTTGAAGGTCAAACGATTGATGACAAGGTCTTCATGAACTTGTTCAACCGCGACAATGTTTTGATTACACCACATACGGCTTTCTACACTGAAACTGCCGTTCACAACATGGTGCACGTTTCAATGAACAGTAACAAACAATTCATCGAAACTGGTAAAGCTGACACACAAGTTAAGTTTGAT 這是我要P的共996個bp的目的基因，希望能幫設計一對引物，謝謝 |
4樓2013-09-17 10:10:05
Apollo919
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5樓2013-09-17 10:31:41
【答案】應助回帖
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gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流！ 2013-09-18 10:20:28
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正向引物：5'-3' CGGGATCCATGAAAATTATTGCATATGCTG GC% 40% Tm=65 反向引物：5'-3' CCCAAGCTTATCAAACTTAACTTGTGTGTCAGC GC% 42% Tm=64 GGATCC是BamHI位點，前面的CG是它的保護堿基，不加的話酶切會很困難，AAGCTT是HindIII,后面的GGG也是它的保護堿基。你的引物一定要和你目的片段的序列是一樣的，這樣才可以擴增出來 |
6樓2013-09-17 16:30:45
舒?zhèn)?/a>
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7樓2013-09-17 19:47:40
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8樓2013-09-18 10:16:04
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