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15879003030銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
做過cDNA文庫的同學(xué)進(jìn)來看看，小弟有幾個(gè)小問題想問一下
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本人要用clontech的634933試劑盒做cDNA文庫。 說明書上最后一步只寫到了擴(kuò)增菌落的這一步，下一步?jīng)]有寫。我想問一下下一步是不是要大量抽大腸桿菌質(zhì)粒？然后保存此質(zhì)粒備用對(duì)嗎？ 是不是要用到質(zhì)粒大提試劑盒呢？ 有做過的同學(xué)出來交流一下經(jīng)驗(yàn)吧~~謝謝啦 |
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15879003030
銅蟲 (小有名氣)
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2樓2013-09-17 20:13:30
faggege
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【答案】應(yīng)助回帖
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以mRNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當(dāng)?shù)妮d體（常用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后轉(zhuǎn)化受體菌，則每個(gè)細(xì)菌含有一段cDNA，并能繁殖擴(kuò)增，這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA文庫。 其實(shí)擴(kuò)增的菌群就是文庫了，后面要做的應(yīng)該就是就是保存菌群了 |
3樓2013-09-18 12:06:28
15879003030
銅蟲 (小有名氣)
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4樓2013-09-18 16:15:49
jasco
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5樓2013-09-18 17:00:53
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