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小墨825新蟲 (小有名氣)
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[求助]
Triton X-114法提取膜蛋白
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| 利用Triton X-114法分層得到膜蛋白（下層），怎么把Triton X-114去除？有沒有可能將膜蛋白轉(zhuǎn)移到水相？衷心求助！ |
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 分子生化實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)積累 | 蛋白質(zhì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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凌波麗
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3樓2013-09-17 22:28:53
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-17 22:41:16
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| TRITON X-114:2-(2-[4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenoxy]ethoxy)ethanol;二乙二醇單[(1,1,3,3-四甲基丁基)苯基]醚;聚氧乙烯辛烷基苯酚醚，是一種表面活性劑，會(huì)結(jié)合到膜蛋白質(zhì)的表面形成一層親水層，而表面活性劑的疏水層會(huì)結(jié)合到膜蛋白質(zhì)的分子表面，這樣包裹了TRITON X-114的蛋白質(zhì)本身就到了水溶液里 |
2樓2013-09-17 22:24:52
凌波麗
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4樓2013-09-17 22:31:27
小墨825
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大神！��！您做過這方面是么，對(duì)于您的回答，我有幾點(diǎn)疑問： 1. 分子篩要選擇哪種？“用分子篩層析分離出表面活性劑的疏水層會(huì)結(jié)合的膜蛋白質(zhì)后”這個(gè)我不是很理解，意思是說分子篩洗脫下來的是表面活性劑疏水層結(jié)合膜蛋白的部分是么？ 2. 加大水溶液的非極性，就是把疏水端溶下來嗎？將表面活性劑與膜蛋白分開？我需要保持蛋白的活性，乙醚可能會(huì)造成損失，并且這一步的溫度和時(shí)間是否有需求？不知道您做的效果如何？ 3.我查到一些文獻(xiàn)用到bio-beads 用batch method來去除，不知道您有沒有使用過？ 非常感謝您，如再次應(yīng)助，我會(huì)追加懸賞的，希望能多多指教。 |
5樓2013-09-18 10:59:54
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