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[求助]
微生物次生代謝產(chǎn)物的研究
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小白一枚，問的問題幼稚希望不要被鄙視~~~~~~~ 本人研究方向是天然藥物化學(xué)，即將做放線菌次生代謝產(chǎn)物的活性研究，想知道次生代謝產(chǎn)物在細(xì)胞體內(nèi)還是培養(yǎng)基中？怎么得到？一般用什么溶劑提��？用什么柱子分離？或者選擇原則是什么？ |
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任_強(qiáng)
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| 樓主不會(huì)是跨專業(yè)吧，看你基本的知識(shí)都不會(huì)。你說你要做放線菌次生代謝產(chǎn)物的活性研究。首先你要培養(yǎng)放線菌吧，這里設(shè)計(jì)菌種的特性、菌種的選擇，培養(yǎng)基的選擇，這些確定了以后就開始將你的菌接到培養(yǎng)基里面，這時(shí)候需要優(yōu)化培養(yǎng)條件。一般情況下產(chǎn)物會(huì)存在于發(fā)酵液里面（因?yàn)槲⑸锂a(chǎn)生次級(jí)代謝產(chǎn)物就是為了分泌出來，以營造利于自身生長的環(huán)境）。其實(shí)在實(shí)驗(yàn)之前，你還需要知道你想得到的產(chǎn)物的特性，比如分子量大小、極性、溶解性等等。知道了之后你才能選擇怎么從發(fā)酵液中分離出你想要的東西，液液萃取還是固液萃取等等。提取完之后再根據(jù)產(chǎn)物可能的特性進(jìn)行純化，最終得到高純產(chǎn)物。分離原則，越簡單越好，越純?cè)胶茫蛛x時(shí)帶入的雜質(zhì)越少越好，越便宜越好，對(duì)人體無害（比如水）更好。總而言之一句話：微生物發(fā)酵就是把菌放到發(fā)酵罐里面，給它食物，給它合適的生存環(huán)境，讓它生長并不斷排泄（說白了次級(jí)代謝產(chǎn)物就是微生物的糞便）。懂了吧。。。多看書吧 |
7樓2013-09-29 09:20:27
huaqiangliu
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| 關(guān)鍵你的指的活性研究是哪方面，你要建立一個(gè)活性檢測方法。然后再去定位你的東西實(shí)在胞內(nèi)還是胞外。其實(shí)大部分活性產(chǎn)物都是次級(jí)代謝產(chǎn)物，有包內(nèi)的，也有胞外的。比如說吧，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的抗生素一般為胞內(nèi)產(chǎn)物，糖肽類的抗生素一般為胞外的。胞內(nèi)產(chǎn)物也好胞外產(chǎn)物也罷。其實(shí)提取分離就那么多種方法，溶媒轉(zhuǎn)換，過柱分離，過柱子 正向，反向，離子交換。正向一般用于胞內(nèi)產(chǎn)物，因?yàn)檫@些東西一般疏水性較強(qiáng)，一般采用硅膠，氧化鋁。反向是通用型的，胞內(nèi)胞外都能用的上一般廣義上講打孔樹脂也放在這，還包括反向?qū)游鰳渲�，反向硅膠。水溶性，離子交換用的較多。但是要是想把一個(gè)產(chǎn)品分離純化到很高純度，學(xué)術(shù)上用于結(jié)構(gòu)鑒定，工業(yè)上用于生產(chǎn)產(chǎn)品，那么就得多種提取分離方法并用，包括最后析晶等等。發(fā)酵產(chǎn)品的下游分離純化需要很多步驟。 |
4樓2013-09-27 21:44:18
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huaqiangliu
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10樓2013-09-29 20:45:46
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