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[求助]
:cry:求助啊！急��！初涉藥代，遇到好多問(wèn)題，實(shí)在進(jìn)行不下去了啊。。。
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1、大家用的是血清還是血漿��？血漿的話抗凝劑用檸檬酸鈉行嗎？液態(tài)的，會(huì)不會(huì)有影響啊？ 2、預(yù)處理時(shí)我直接甲醇沉淀蛋白，離心，取上清液進(jìn)樣，沒(méi)有吹干復(fù)溶，沒(méi)有過(guò)濾膜，這樣可行嗎？處理過(guò)的樣品放置一會(huì)兒后渾濁是怎么回事��？除蛋白不夠徹底嗎？ 3、現(xiàn)用色譜條件下，將血清與含藥甲醇混合后原來(lái)可以檢測(cè)到藥物，但是雙峰（我們這藥不太穩(wěn)定，見(jiàn)光易分解，尤其是在液態(tài)情況下），現(xiàn)在同樣的條件，同樣的處理，色譜峰特別小，幾乎檢測(cè)不到啊，求解啊 4、藥物濃度是反映在峰高還是峰面積呢？ 5、安捷倫1200中文工作站打印報(bào)告時(shí)不能正常生成PDF文件，總顯示參數(shù)錯(cuò)誤，怎么破��？ 希望大家踴躍幫忙，小女子先謝過(guò)了。。。 |
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時(shí)鐘555
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2樓2013-09-29 23:43:54
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1 2013-09-30 08:56:29
趙丹-1989: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-10-02 10:11:42
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1 2013-09-30 08:56:29
趙丹-1989: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-10-02 10:11:42
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水平有限 針對(duì)1和2，提點(diǎn)個(gè)人意見(jiàn)： 1：血清還是血漿看你個(gè)人需要 采血漿的話在取的全血中要加入抗凝劑，常用枸櫞酸鈉or肝素鈉，液態(tài)的 我這邊常用的1%的肝素鈉生理鹽水 100ul全血加1ul就可以了 影響可以忽略的 2：不吹干復(fù)溶、不過(guò)濾膜也可行，只是會(huì)傷柱子，一般也不會(huì)這樣操作。 處理過(guò)的樣品變渾濁可能是離心轉(zhuǎn)速不夠?qū)е鲁恋聿粡氐護(hù)r吸上清的時(shí)候吸到沉淀or蛋白沒(méi)沉淀完全 建議：可以離心取完上清之后再離心一次；或者吹干復(fù)溶。 |
3樓2013-09-30 08:22:27
4樓2013-09-30 08:47:58
5樓2013-09-30 08:51:59
wm彼岸花
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
karl2100: 金幣+1, 謝謝回復(fù)！ 2013-09-30 11:52:52
趙丹-1989: 金幣+1 2013-10-02 10:12:30
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
karl2100: 金幣+1, 謝謝回復(fù)！ 2013-09-30 11:52:52
趙丹-1989: 金幣+1 2013-10-02 10:12:30
| 預(yù)處理時(shí)我直接甲醇沉淀蛋白，離心，取上清液進(jìn)樣，沒(méi)有吹干復(fù)溶，沒(méi)有過(guò)濾膜，這樣可行嗎？處理過(guò)的樣品放置一會(huì)兒后渾濁是怎么回事��？除蛋白不夠徹底嗎？血樣的前處理有液液萃取和蛋白沉淀，我想你用的是蛋白沉淀，可以用這種方法，如果怕對(duì)柱子傷害比較大，可離心2次，甲醇沉淀時(shí)甲醇體積2-3倍，這樣有90%以上的蛋白沉淀了，進(jìn)樣前樣品放置渾濁是不是你樣品不穩(wěn)定降解的原因 |
6樓2013-09-30 10:30:07
hanxizhen
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