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[求助]
:cry:求助啊!急!初涉藥代,遇到好多問題,實在進(jìn)行不下去了啊。。。
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1、大家用的是血清還是血漿?血漿的話抗凝劑用檸檬酸鈉行嗎?液態(tài)的,會不會有影響? 2、預(yù)處理時我直接甲醇沉淀蛋白,離心,取上清液進(jìn)樣,沒有吹干復(fù)溶,沒有過濾膜,這樣可行嗎?處理過的樣品放置一會兒后渾濁是怎么回事?除蛋白不夠徹底嗎? 3、現(xiàn)用色譜條件下,將血清與含藥甲醇混合后原來可以檢測到藥物,但是雙峰(我們這藥不太穩(wěn)定,見光易分解,尤其是在液態(tài)情況下),現(xiàn)在同樣的條件,同樣的處理,色譜峰特別小,幾乎檢測不到啊,求解啊 4、藥物濃度是反映在峰高還是峰面積呢? 5、安捷倫1200中文工作站打印報告時不能正常生成PDF文件,總顯示參數(shù)錯誤,怎么破? 希望大家踴躍幫忙,小女子先謝過了。。。 |
木蟲 (正式寫手)
| 預(yù)處理時我直接甲醇沉淀蛋白,離心,取上清液進(jìn)樣,沒有吹干復(fù)溶,沒有過濾膜,這樣可行嗎?處理過的樣品放置一會兒后渾濁是怎么回事啊?除蛋白不夠徹底嗎?血樣的前處理有液液萃取和蛋白沉淀,我想你用的是蛋白沉淀,可以用這種方法,如果怕對柱子傷害比較大,可離心2次,甲醇沉淀時甲醇體積2-3倍,這樣有90%以上的蛋白沉淀了,進(jìn)樣前樣品放置渾濁是不是你樣品不穩(wěn)定降解的原因 |
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水平有限 針對1和2,提點個人意見: 1:血清還是血漿看你個人需要 采血漿的話在取的全血中要加入抗凝劑,常用枸櫞酸鈉or肝素鈉,液態(tài)的 我這邊常用的1%的肝素鈉生理鹽水 100ul全血加1ul就可以了 影響可以忽略的 2:不吹干復(fù)溶、不過濾膜也可行,只是會傷柱子,一般也不會這樣操作。 處理過的樣品變渾濁可能是離心轉(zhuǎn)速不夠?qū)е鲁恋聿粡氐護(hù)r吸上清的時候吸到沉淀or蛋白沒沉淀完全 建議:可以離心取完上清之后再離心一次;或者吹干復(fù)溶。 |
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