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yinyin1988木蟲 (小有名氣)
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[交流]
液相色譜 流動(dòng)相的問(wèn)題 已有2人參與
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| 查了一下高效液相色譜常用的流動(dòng)相為甲醇-水和乙腈-水,很多人說(shuō)樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)品溶液最好用流動(dòng)相來(lái)配制,但是很多有機(jī)物都不溶于甲醇-水和乙腈-水體系或溶解不完全(不均勻或不成均相吧),是否說(shuō)明樣品溶液可以不用流動(dòng)相來(lái)配制啊,如果是,那是不是用流動(dòng)相中的有機(jī)相(甲醇或乙腈)來(lái)配制會(huì)比其他溶劑要好些啊 |
金蟲 (正式寫手)

金蟲 (正式寫手)
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樓主你好,目前hplc分析多為反相色譜,流動(dòng)相多為甲醇、乙腈、水,加各種添加劑以改善分離性能。樣品一般用與流動(dòng)相相溶的溶劑溶解。最佳的溶解方法是用流動(dòng)相溶解,但是很多情況是不一致的。當(dāng)用溶劑極性強(qiáng)度大的試劑,如純甲醇、純乙腈,純乙醇,而分析體系中以水為主,樣品進(jìn)樣量大,如定量管為20ul,此條件下完全可以肯定,單一的純物質(zhì)出雙峰,第二峰比第一峰。看味疾惶粯樱,且拖尾,保留時(shí)間會(huì)提前(相對(duì)進(jìn)樣量少而言),將進(jìn)樣量減少一半以上,峰型將變?yōu)檎!_@是樣品的溶劑與流動(dòng)相極性相差太大,而流動(dòng)相來(lái)不及將其稀釋達(dá)到平衡造成的。上面提到進(jìn)樣量造成雙峰的一個(gè)原因,另一個(gè)原因是,進(jìn)樣量不一定大,但絕對(duì)量很大,色譜圖上的雙峰緊靠在一起,基本上齊高,不拖尾(如果出峰很快,也可能是色譜柱問(wèn)題)。將樣品稀釋再進(jìn)樣就可以了,這是由于進(jìn)樣量過(guò)大,色譜柱過(guò)載造成的。 稀釋劑如果不能跟流動(dòng)相保持一致,即稀釋劑不能完全溶解樣品時(shí),我自己通常會(huì)加入其中的有機(jī)相也就是甲醇或者乙腈來(lái)輔助溶解,液相樣品超聲溶解也是很普遍的。假如樣品依舊不溶解,我自己通常選擇過(guò)濾,然后走樣。認(rèn)為假如調(diào)整有機(jī)相比例后仍不能溶解,假如加入異丙醇之類溶劑輔助溶解,遇到流動(dòng)相后有可能析出樣品,造成柱子堵塞,得不償失的。樣品過(guò)濾后依然較為渾濁,需要再過(guò)濾,還不行就只好放棄進(jìn)樣了。 |

金蟲 (正式寫手)

木蟲 (小有名氣)
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你好 我分析的是己二酸和己二酸二丁酯,之前用的是的甲醇(18%)--水、緩沖鹽作為流動(dòng)相(這樣的比例主要適合己二酸,它易解離),但當(dāng)用該流動(dòng)相配制己二酸二丁酯樣品溶液時(shí),超聲后溶液呈渾濁狀,沒(méi)敢進(jìn)樣。接著用純甲醇先溶解了一點(diǎn)己二酸二丁酯,然后又加入了流動(dòng)相定容,該過(guò)程甲醇占大量,溶液看起來(lái)是澄清透明的,但超聲過(guò)程中明顯看到酯往上跑,溶液表面估計(jì)是酯,呈氣泡狀,請(qǐng)問(wèn)咋辦 還有就是這兩種物質(zhì)的紫外吸收很小,紫外分光光度計(jì)全波段掃描沒(méi)發(fā)現(xiàn)吸收峰,己二酸摸索了好久才知道了它的出峰條件(波長(zhǎng)210nm),己二酸二丁酯的紫外吸收波長(zhǎng)還不知道,昨天想在210nm處看其出峰位置(看見(jiàn)好多紫外吸收弱的物質(zhì)的液相波長(zhǎng)設(shè)置的是210nm),結(jié)果配溶液時(shí)就出現(xiàn)了上面的問(wèn)題 |
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