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sexy758新蟲 (初入文壇)
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[求助]
BL21大腸桿菌大規(guī)模生產(chǎn)初期自溶 已有5人參與
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小弟目前在大腸桿菌發(fā)規(guī)模發(fā)酵上遇到了很大的問題: 我們目前采取的是三級(jí)發(fā)酵,發(fā)現(xiàn)三級(jí)發(fā)酵罐移種后頭1~2小時(shí)菌種生長(zhǎng)正常,但OD600到了2左右就開始溶氧上升,OD下降到滅菌后水平,PH上升,通過鏡檢發(fā)現(xiàn)菌種已經(jīng)自溶,大約再過8-10小時(shí)又能長(zhǎng)上來,蛋白也能夠正常表達(dá)。有時(shí)候又能夠長(zhǎng)得很好,不出現(xiàn)這個(gè)問題。 最初在是在三級(jí)發(fā)酵罐出現(xiàn)這種現(xiàn)象,但最近在一二級(jí)種子罐內(nèi)也開始發(fā)生菌體自溶現(xiàn)象,出現(xiàn)問題的發(fā)酵液都做過噬菌體平板,沒有發(fā)現(xiàn)噬菌斑存在。 菌種在LB培養(yǎng)基中生長(zhǎng)正常,移入發(fā)酵培養(yǎng)基中后就會(huì)隨機(jī)發(fā)生自溶現(xiàn)在,我懷疑可能是C/N比不平衡造成,也向大家請(qǐng)教下有沒有別的解決思路,小弟在此感謝不盡。 |
鐵蟲 (小有名氣)
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