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lantianjesus新蟲 (小有名氣)
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[交流]
做吸附材料時，出現(xiàn)了很多問題，希望高手提供寶貴意見 已有4人參與
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以前從未接觸吸附領(lǐng)域，很多都不懂，近期實驗出現(xiàn)了很多問題，希望蟲友指教： 1. 我用紫外法測吸附蛋白質(zhì)濃度，結(jié)果做了好幾次，吸附后比吸附前濃度還大，蛋白質(zhì)溶液用實驗室超純水機產(chǎn)水配置，PH6.6。是不是必須用緩沖液呢？用哪種緩沖液比較好呢？ 2. 再做蛋白質(zhì)標準曲線時候，我是用1mg/mlBSA溶液，稀釋不同倍數(shù)（約0-1mg/ml）后側(cè)OD值，為什么線性很差呢？呈指數(shù)形式。 |
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異氰酸酯: 金幣+1, 感謝交流 2013-12-09 10:40:24
| 蛋白質(zhì)一般都非常脆弱，容易變性，在變性過程中，蛋白質(zhì)外面所含的生色基團有所不同，甚至能超過你吸附后的量，所以做蛋白質(zhì)實驗最基本的要求是對其達到穩(wěn)定。緩沖溶液是最好也是常用的穩(wěn)定蛋白質(zhì)體系，一般有磷酸類、TRIS-鹽酸類等。pH值有6.8、7.0、7.2，甚至更大或更小，關(guān)鍵是看你的要求和在你要求范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)是否穩(wěn)定。還有做蛋白質(zhì)標準曲線的時候，稀釋法的確是能導致你所做的情況。 |
4樓2013-10-10 08:12:50
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5樓2013-10-10 16:57:10
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7樓2013-10-11 10:55:49
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8樓2013-10-11 18:27:40
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10樓2013-10-13 07:50:03
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