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[求助]
BLAST的使用方法
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| 請問利用BLAST如何進(jìn)行序列比對?跪求各位高手指點(diǎn)一下具體的方法~不勝感激!急急急 |
基因工程和分子生物學(xué) |
木蟲 (正式寫手)
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進(jìn)入以下網(wǎng)址:http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi 普通的blast在basic blast區(qū)域進(jìn)行選擇就行,如核苷酸-核苷酸序列比對直接選擇nucleotide blast,其他的選項(xiàng)還有氨基酸-氨基酸序列比對(protein blast)、翻譯核苷酸序列-蛋白序列比對(blastx)等,你可以根據(jù)自己的需要進(jìn)行選擇。 單擊后進(jìn)入新的界面,在enter query sequence的對話框中輸入你要比對的序列或序列的NCBI登陸號或genebank的登錄號,如果是下載下來的.fasta格式的文件也可以在upload file處點(diǎn)擊瀏覽,然后在電腦中找到相應(yīng)的文件存儲位置,選擇“打開”就行。 下面有一些比對的參數(shù)設(shè)置,除有特殊要求外可以不做改動。但對于數(shù)據(jù)庫的選擇可能會影響比對結(jié)果的數(shù)目。此外“Algorithm parameters ”下拉菜單也可以打開并可以進(jìn)行一些比對參數(shù)的設(shè)置,也可以視 需要進(jìn)行更改。 所有參數(shù)設(shè)置好后,點(diǎn)擊“BLAST”按鈕即可,稍等一會,網(wǎng)頁上就會出現(xiàn)比對結(jié)果。樓主可以根據(jù)需要進(jìn)行選擇。如果樓主想對若干個(gè)已知的序列進(jìn)行比對,也可以將序列下載下來,用單機(jī)版的比對軟件進(jìn)行比對。 |

木蟲 (正式寫手)
NCBI數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)或序列都是已知的,包括部分單基因全序列、編碼序列(cds)以及一些基因組或染色體的全序列。因此你說的B基因或C基因在A基因的下游,這種情況在特定的染色體上或基因組中是確定的,當(dāng)然不同物種的基因序列和排列次序可能略有差異。單純通過單個(gè)基因的序列比對是不能確定先后順序的。如果你要通過比對來確定A基因后的序列到底是B還是C的話,你必須獲得基因A及其下游的序列,然后再進(jìn)行比對。blast會給出部分序列的比對結(jié)果,然后你就可以確定次序了;蛘吣阋部梢栽O(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR驗(yàn)證! |

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