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wwsswww金蟲 (初入文壇)
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[求助]
血小板黏附實(shí)驗 拍電鏡未得到想要的結(jié)果 一些問題
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最近在做血小板黏附實(shí)驗，拍了幾次SEM感覺制樣失敗，請大家?guī)兔纯词悄睦锍隽藛栴}，熱烈歡迎多多討論。 材料是薄膜形態(tài)。 ------------------------------------------------------ 富血小板血漿（PRP)制備：采用的是兔血，耳緣取血后，以 9:1 與 109 mol/L 檸檬酸三鈉溶液混合，1200rpm 離心15min，取上層清液。 黏附過程：37℃，將材料浸泡1h；PBS輕輕洗滌；用2.5%戊二醛-PBS溶液在4℃下固定24h;乙醇-水溶液(30,50,70,80,90,95,100%)梯度脫水,每個梯度30min;噴金測SEM. ------------------------------------------------------- 拍得電鏡圖如下 文獻(xiàn)中的如下 和文獻(xiàn)對比發(fā)現(xiàn)完全不像  ，拍出來橢圓狀的不像血小板有偽足伸出。------------------------------------------------------- 疑問：1.PRP的制備中是不是有問題，而導(dǎo)致沒有收集到富含血小板的血漿; 2.有些文獻(xiàn)中梯度脫水溶液是用乙醇和PBS配制的，但是乙醇含量50%以后就會出現(xiàn)渾濁，應(yīng)該是鹽在乙醇中的溶解度下降導(dǎo)致的，所以不清楚這個乙醇-PBS到底是怎么配制的； 3.電鏡圖上有些點(diǎn)，沒有具體形貌，會不會是操作過程中混入的臟東西; 4.最后的干燥，如果不用凍干機(jī)，置于干燥器中自然晾干是否可行呢. 各位前輩大牛，求解答。。。 [ Last edited by wwsswww on 2013-10-11 at 10:23 ] |
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2樓2013-10-11 10:25:44
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5樓2013-10-11 10:31:44
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我是上學(xué)的時候做過這個實(shí)驗，具體記不清了。這個帖子http://www.gaoyang168.com/html/200908/1487363.html上面說富含血小板血漿上層液（PRP）再以3000r／min離心10min，制備得到血小板血漿（PPP）。你可以點(diǎn)擊鏈接看看~ |
6樓2013-10-11 10:39:19
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7樓2013-10-11 10:40:30
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8樓2013-10-11 10:50:18
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9樓2013-10-11 10:53:11
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還是非常感謝 10樓2013-10-11 10:55:00
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