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wwsswww金蟲 (初入文壇)
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[求助]
血小板黏附實驗 拍電鏡未得到想要的結(jié)果 一些問題
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最近在做血小板黏附實驗，拍了幾次SEM感覺制樣失敗，請大家?guī)兔纯词悄睦锍隽藛栴}，熱烈歡迎多多討論。 材料是薄膜形態(tài)。 ------------------------------------------------------ 富血小板血漿（PRP)制備：采用的是兔血，耳緣取血后，以 9:1 與 109 mol/L 檸檬酸三鈉溶液混合，1200rpm 離心15min，取上層清液。 黏附過程：37℃，將材料浸泡1h；PBS輕輕洗滌；用2.5%戊二醛-PBS溶液在4℃下固定24h;乙醇-水溶液(30,50,70,80,90,95,100%)梯度脫水,每個梯度30min;噴金測SEM. ------------------------------------------------------- 拍得電鏡圖如下 文獻中的如下 和文獻對比發(fā)現(xiàn)完全不像  ，拍出來橢圓狀的不像血小板有偽足伸出。------------------------------------------------------- 疑問：1.PRP的制備中是不是有問題，而導(dǎo)致沒有收集到富含血小板的血漿; 2.有些文獻中梯度脫水溶液是用乙醇和PBS配制的，但是乙醇含量50%以后就會出現(xiàn)渾濁，應(yīng)該是鹽在乙醇中的溶解度下降導(dǎo)致的，所以不清楚這個乙醇-PBS到底是怎么配制的； 3.電鏡圖上有些點，沒有具體形貌，會不會是操作過程中混入的臟東西; 4.最后的干燥，如果不用凍干機，置于干燥器中自然晾干是否可行呢. 各位前輩大牛，求解答。。。 [ Last edited by wwsswww on 2013-10-11 at 10:23 ] |
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9樓2013-10-11 10:53:11
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2樓2013-10-11 10:25:44
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