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gyl1990915鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
脊髓做WB 內(nèi)參總是不齊
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| 每次用脊髓做WB，內(nèi)參總是不整齊。求高手解釋，定量和上樣都沒有問題 |
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beckham27
銀蟲 (正式寫手)
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- 帖子: 770
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- 專業(yè): 神經(jīng)生物學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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http://www.gaoyang168.com/html/201103/2946562.html http://bbs.bbioo.com/thread-96560-1-1.html http://www.dxy.cn/bbs/topic/19720782 http://www.biomart.cn/experiment/87/question/309.htm http://www.dxy.cn/bbs/topic/25543043 以上是別人的總結(jié)。 建議：你找實(shí)驗(yàn)室可信的人要2組細(xì)胞的樣品， 第1組4個(gè)樣：沒有細(xì)胞凋亡的，未加破壞性藥物處理。 第2組4個(gè)樣：含有加破壞性藥物的，比如MPP+，當(dāng)然必須有negative control。 第三組4個(gè)樣：你自己脊髓的樣品，有藥物處理組、對(duì)照組。 全部同樣操作，一起定量，一起上樣，一塊膠，一張膜…… 配膠的時(shí)候嚴(yán)格按照配方來，下層膠在加APS后充分搖勻，再加TEMED搖勻，用100%的乙醇1 ml液封，凝30-45min，上層膠凝25 min。做可以和內(nèi)參裁開的目的蛋白，隨便什么，建議找一個(gè)非常好做的。 然后看結(jié)果，到底是你實(shí)驗(yàn)操作的問題，還是樣品的問題。 |
2樓2013-10-18 09:07:27
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