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[求助]
求近幾年膜蛋白的研究熱點�。�！
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各位大神，我想申請香港的研究生，需要寫一個research proposal…… 我本科學(xué)藥物制劑，最近剛做完畢設(shè)，是做藥物篩選的，用的方法是配體垂釣法，就是把蛋白質(zhì)固定到磁珠上，然后跟天然藥物的提取物孵育，收集上清液過HPLC, 磁珠用乙腈洗脫，洗脫液過HPLC，分析出蛋白跟那些單體結(jié)合了（大概是這樣……） 目前我的想法是：提取分離膜蛋白——蛋白固定——加入天然藥物的提取物孵育——分析 所以想了解一下近幾年膜蛋白的研究熱點，比如有哪些蛋白啦，作用是什么啦 另外我的想法有什么不足的也請大家指出哈~~ |
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2樓2013-10-21 21:02:25
3樓2013-10-22 10:40:45
ynkuaile
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gyesang: 回帖置頂 2013-10-24 00:24:23
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隨便說一點，你自己分析分析： 1. 你想提取膜蛋白固定磁珠。為何取膜蛋白，如何避免胞內(nèi)蛋白？靶標(biāo)蛋白是細(xì)胞范圍分布的，并非只在膜上。 2. 天然藥物提取物是一個非常雜的成分，如何分析結(jié)合上還是沒有結(jié)合你蛋白上，結(jié)合上的是什么也無法確認(rèn)。 3. 結(jié)合在你磁珠上的蛋白也是個非常雜的體系，能夠結(jié)合多少配體是未知，結(jié)合多少種更是未知。 4. 天然藥物分子與蛋白的作用力是非常弱的，一般有活性的天然產(chǎn)物其活性都在微摩爾級別，除非你能篩到共價結(jié)合的，非共價結(jié)合的，我覺得你垂釣不到。 5. 如何確證是哪個分子結(jié)合的哪一種蛋白。 6. 如何排除非特異性的結(jié)合。 |
4樓2013-10-22 14:32:03
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非常感謝你指出的這些問題！除了第二個我覺得可以解決之外其他我著實都沒有考慮到…… 對于這些問題，我覺得只能通過看文獻(xiàn)看看有沒有解決的方案啦……但是從哪方面下手找文獻(xiàn)又完全沒有頭緒TAT 我打個比方吧，總有已經(jīng)從膜上已經(jīng)研究的比較透徹的了蛋白吧？是不是可以通過逆轉(zhuǎn)錄、基因工程之類的，大量的得到蛋白的單體，在把蛋白通過共價結(jié)合到磁珠上，在配體垂釣？ 當(dāng)然為了提高實驗的成功率，中藥的選擇當(dāng)然也很關(guān)鍵，可以通過查閱文獻(xiàn)看看它主要有什么功效，可能會跟這個蛋白有作用，再去進行實驗。 也不知道我有沒有表達(dá)清楚…… 所以……求大神推薦推薦膜蛋白的研究熱點之類的？ 最近準(zhǔn)備看施一公的文章，但是又覺得太高端了…… |
5樓2013-10-23 10:46:27
ynkuaile
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施一公是做結(jié)構(gòu)的，不是做藥物篩選的。他做的不是靶標(biāo)蛋白，你要篩藥，首先確定，你這個蛋白是否是靶標(biāo)蛋白或者是潛在的靶標(biāo)蛋白。如果不是靶蛋白，篩出來了又有什么用呢？我覺得你可以把范圍縮小點，確定靶蛋白去找活性小分子，或者確定小分子去找你的蛋白。 |
6樓2013-10-23 13:08:06
7樓2013-10-23 18:41:15
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