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[求助]
求近幾年膜蛋白的研究熱點。。
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各位大神,我想申請香港的研究生,需要寫一個research proposal…… 我本科學藥物制劑,最近剛做完畢設,是做藥物篩選的,用的方法是配體垂釣法,就是把蛋白質(zhì)固定到磁珠上,然后跟天然藥物的提取物孵育,收集上清液過HPLC, 磁珠用乙腈洗脫,洗脫液過HPLC,分析出蛋白跟那些單體結合了(大概是這樣……) 目前我的想法是:提取分離膜蛋白——蛋白固定——加入天然藥物的提取物孵育——分析 所以想了解一下近幾年膜蛋白的研究熱點,比如有哪些蛋白啦,作用是什么啦 另外我的想法有什么不足的也請大家指出哈~~ |
木蟲 (小有名氣)
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隨便說一點,你自己分析分析: 1. 你想提取膜蛋白固定磁珠。為何取膜蛋白,如何避免胞內(nèi)蛋白?靶標蛋白是細胞范圍分布的,并非只在膜上。 2. 天然藥物提取物是一個非常雜的成分,如何分析結合上還是沒有結合你蛋白上,結合上的是什么也無法確認。 3. 結合在你磁珠上的蛋白也是個非常雜的體系,能夠結合多少配體是未知,結合多少種更是未知。 4. 天然藥物分子與蛋白的作用力是非常弱的,一般有活性的天然產(chǎn)物其活性都在微摩爾級別,除非你能篩到共價結合的,非共價結合的,我覺得你垂釣不到。 5. 如何確證是哪個分子結合的哪一種蛋白。 6. 如何排除非特異性的結合。 |
木蟲 (正式寫手)
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非常感謝你指出的這些問題!除了第二個我覺得可以解決之外其他我著實都沒有考慮到…… 對于這些問題,我覺得只能通過看文獻看看有沒有解決的方案啦……但是從哪方面下手找文獻又完全沒有頭緒TAT 我打個比方吧,總有已經(jīng)從膜上已經(jīng)研究的比較透徹的了蛋白吧?是不是可以通過逆轉(zhuǎn)錄、基因工程之類的,大量的得到蛋白的單體,在把蛋白通過共價結合到磁珠上,在配體垂釣? 當然為了提高實驗的成功率,中藥的選擇當然也很關鍵,可以通過查閱文獻看看它主要有什么功效,可能會跟這個蛋白有作用,再去進行實驗。 也不知道我有沒有表達清楚…… 所以……求大神推薦推薦膜蛋白的研究熱點之類的? 最近準備看施一公的文章,但是又覺得太高端了…… |
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