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sujunfeng89金蟲 (小有名氣)
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[求助]
各位哥哥姐姐，求教了
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| 小弟做了大腸桿菌一個(gè)基因的熒光定量，只做了相對(duì)定量，因?yàn)橄脒@一基因的表達(dá)是否上調(diào)，結(jié)果出來了，現(xiàn)在又想知道在蛋白水平上是否上調(diào)，有什么辦法能夠從蛋白水平檢測基因表達(dá)是否上調(diào)呢？用不用上western blot？求教啊�。≈x過！ |
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ynkuaile
木蟲 (小有名氣)
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2樓2013-10-26 10:46:22
snowfling
新蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
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sujunfeng89: 金幣+20, ★有幫助 2013-12-13 15:30:12
sujunfeng89: 金幣+20, ★有幫助 2013-12-13 15:30:12
| 這個(gè)還是做Western吧。我現(xiàn)在在做的這個(gè)和你類似的。mRNA水平如果有上調(diào)的話，說明轉(zhuǎn)錄出來的多，而mRNA用于翻譯蛋白質(zhì)，所以從理論水平上說應(yīng)該在你取的這個(gè)時(shí)間點(diǎn)往后再推一點(diǎn)時(shí)間取樣，做一個(gè)western得到蛋白水平上的變化，以此來說明這個(gè)基因是參與實(shí)際功能的。如果它只是mRNA上調(diào)而蛋白質(zhì)沒有變化的話，不好說明它是參與實(shí)際功能的啊。所以如果它參與功能，它在蛋白水平上就應(yīng)該上調(diào)，相應(yīng)的做western就應(yīng)該能檢測出來的。 |
3樓2013-11-17 20:14:48
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