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sujunfeng89金蟲 (小有名氣)
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[求助]
各位哥哥姐姐,求教了
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| 小弟做了大腸桿菌一個基因的熒光定量,只做了相對定量,因為想這一基因的表達是否上調(diào),結(jié)果出來了,現(xiàn)在又想知道在蛋白水平上是否上調(diào),有什么辦法能夠從蛋白水平檢測基因表達是否上調(diào)呢?用不用上western blot?求教。!謝過! |
木蟲 (小有名氣)
| 這個還是做Western吧。我現(xiàn)在在做的這個和你類似的。mRNA水平如果有上調(diào)的話,說明轉(zhuǎn)錄出來的多,而mRNA用于翻譯蛋白質(zhì),所以從理論水平上說應該在你取的這個時間點往后再推一點時間取樣,做一個western得到蛋白水平上的變化,以此來說明這個基因是參與實際功能的。如果它只是mRNA上調(diào)而蛋白質(zhì)沒有變化的話,不好說明它是參與實際功能的啊。所以如果它參與功能,它在蛋白水平上就應該上調(diào),相應的做western就應該能檢測出來的。 |
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