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rananuo1新蟲 (初入文壇)
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[求助]
請(qǐng)教酶分離純化的一個(gè)問題，請(qǐng)各位蟲友幫幫忙
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各位蟲友大家好，請(qǐng)教大家一個(gè)問題，還望能得到靠譜的答復(fù)： 1. 我現(xiàn)在要做一個(gè)把真菌中的一種降解農(nóng)藥的酶分離純化出來(lái)，如果用鹽析柱層析然后凝膠電泳檢測(cè)的話會(huì)使酶失活，無(wú)法檢測(cè)。不知道如何在保持酶活性的情況下，對(duì)酶進(jìn)行分離純化呢？ 2. 還有，因?yàn)榧?xì)菌降解農(nóng)藥的酶已經(jīng)研究的比較透徹，如果采用從細(xì)菌當(dāng)中克隆降解酶同源基因的話，應(yīng)該怎么做呢？謝謝各位~ |
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pennchem
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流！ 2013-10-27 17:44:02
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1: 一般這樣酶的純化很有可能有文獻(xiàn)報(bào)道，即使不是這個(gè)酶，和這個(gè)酶性質(zhì)接近的酶被純化的文獻(xiàn)也是不難找的，找到后照著做就好了，否則就開始從陰陽(yáng)離子柱，分子篩等等方式，每一步都檢測(cè)酶活性，最后總能純化出你要的蛋白 2：克隆基因不是三言兩語(yǔ)就可以說(shuō)出的，有完整的文獻(xiàn)攻略，可以問問師兄師姐，或者分子實(shí)驗(yàn)指南 |
2樓2013-10-27 12:11:08
rananuo1
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3樓2013-10-28 09:18:40
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4樓2013-10-29 21:57:38
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5樓2013-10-30 14:51:31
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